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研究生虢镌让仗晗缭拢同研究生签名:趁促足帆讼独创性声明关于论文使用授权的声明如,/年么月,/同夕口,,年缮甊本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得中国农业科学院或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示了谢意。本人完全了解中国农业科学院有关保留、使用学位论文的规定,即:中国农业科学院有权保留送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意中国农业科学院可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。导师签名:鼬间:时间:/
槭却做今耀\\天帆时榈中国农业科学院硕士学位论文评阅人、答辩委员会签名表武夷菌素生物合成基因簇的克隆及分析研究方向生物防治张克诚培养单位芯克植物保护研究所硕姓名职称位业签名论文题目植物病虫害论文作者檀贝贝专业植物病理学指导教师单专导师硕导口中国农业科学院植物保护徐世昌研究员博导√研究所人文景芝教授东北农业大学辩生化与分子邱德文生物学郑永权农药学中国农业大学李国庆华中农业大学≤乡硕导√中国检验检疫科学研究院博导口动植物检验检疫研究所委会议记录厥孙蕾论文答辩时间地点年衔泄┛圃褐脖K谝换嵋槭评阅放主席王琦答吴品珊贝口‘’
摘要,鐾亚饷甯鐾;乖,鱿┗乖个酰基载体蛋白和酰基载体蛋白籇啦编码合成过程中某一模块的酮合成酶;长度武夷菌素怯刹晃疵咕湟谋渲产生的一种新型农用抗生素,对多种真菌性病害具有良好的防治效果。采用物理化学诱变的方法选育武夷菌素高产菌株虽然取得了一些进展,但仍不能满足育种和生产上需要。因此,采用分子生物学方法提高武夷菌素效价具有非常重要的意义。本研究构建了武夷菌素产生菌基因组文库,克隆武夷菌素生物合成基冈簇并且分析了其功能。此外利用诱变的方法筛选到了武夷菌素生物合成阻断突变株。结果如下:捎胮为载体构建了不吸水链霉菌武夷变种基因组文库,文库滴度为×痬目饪筛哺腔蜃倍以上。根据同类型抗生素生物合成基因设计特异性引物,最终确定以人环内酯类聚酮合成酶基因设计的引物筛选基因组文库。捎肞方法对基因组文库进行筛选得到了三个阳性克隆,对阳性克隆酶切后测序最终得剑了长度为的片段,。涂股聚酮类化合物阅?樾问胶铣伞8眯列包含鐾暾腛7旁亩量,推测编码武夷菌素生物合成起始模块的酮还原酶,为克隆到的最长序列,其编码的蛋白质包含鼍弁:厦个酰基转移酶构成了合成中的五个模块:编码武夷菌素生物合成中的硫酯酶,参与聚酮长链的环化和水解;鹞R恢肿B嫉骺匾蜃樱嗦氲牡鞍字适粲贚鞍准易澹谧B脊唐鹫虻鹘晕湟木夭鶦为出发菌株,通过诱变处理得到一株丧失抑菌活性且性状稳定的突变株。突变株孢子丝为长螺旋形,孢子呈椭圆形,与出发菌株相比,在形态上没有显著变化且产孢量无变化。突变株的抑菌谱发生了显著变化,对所有止┦跃昃抟种谱饔谩8效液相色谱分析发现突变株中抗生素的特征峰消失。武夷菌素生物合成基因簇的克隆为今后采用分子生物学方法改造菌株和研究抗生素代谢途径奠定了基础。抗生素生物合成阻断突变株是推断抗生素合成途径的良好材料,武夷菌素生物合成阻断突变株的筛选为抗生素生物合成途径研究提供依据,同时也为武夷菌素生物合成基因功能验证提供了受体。关键词:武夷菌素,基冈组文库,基因簇,阻断突变株生物信息学分析表明武夷菌素可能是为作用。
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录目第一章绪论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯链霉菌简介及其基因组概述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯抗生素生物合成基因簇的克隆策略⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。.〉⊥.ü寺】股啬鸵┬》〉』颉基因组文库构建策略⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯...妇斯と旧⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.载体滤乖靥⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一载体⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。抗生素生物合成基因研究进展⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..@嗫股厣锖铣苫蜓芯