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根癌农杆菌介导的Expansin基因转化烟草的探究.pdf

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文档介绍

文档介绍:幸匆母蔫学、础窈粒嘿洹!、的鱪基因转化烟尊的研究,.!!!!猒—一二—一学科专业名称;.:..疲一一谴路。,≯≥..唬呼笈一二一学号:.。一——堑壹量』R邓年方亡各文答辩口期:墨鷌屋:、畚奶峤蝗掌冢学位授予单谊和日期:。可旦..,∑::.一。—————二一‘R灰弧研究’方献..、蕉堑基璺墨蓬:。.:.:÷一至垫堂二炅分类号:,指导教师姓名:申请学位级别:答辩委员会主席:密级单位畆■:、。,。一。●,。、。’一,、,’~÷÷,’‘...、
Р导师签名:∥哆幺巍中南林业科技大学作者签名:孓胪学位论文原创性声明学位论文版权使用授权书年月,汨年拢琩日本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定,同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件或电子版,允许论文被查阅或借阅。本人授权中南林业科技大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。本学位论文属于:权书。肽谝陨舷嘤Ψ娇虼保密口,在年解密后适用本授不保密口。年挛本人郑重声明:所呈交的论文是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容外,本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写的成果作品,也不包含为获得中南林业科技大学或其他教育机构的学位或证书所使用过的材料。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式表明。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。“√,,’●
要摘是近年来发现的迄今惟一能诱导热钝化的离体细胞壁伸展的细胞壁特异性蛋白质。在控制植物细胞生长方面,能调节细胞壁的膨胀。可以通过生长素调控,引起下降,激活相关水解酶,引起木葡聚糖或黄暇厶堑劝胂宋氐慕到猓蚨习胂宋赜胂宋匚⑾怂恐涞那键,改变细胞壁的承重网络,从而加速生长。如果将基因转入杨树、桉树等重要林木,则可以提高林木的生长速率,加速成材,具有很大的应用前景及经济价值。烟草是最早也是最多应用于分子生物学和基因工程研究的模式植物之一。本实验通过农杆菌菌介导法用含有抗卡那霉素的基因的双元载体将基因导入到烟草叶外植体中,然后在含有卡那霉素的选择培养基上进行筛选培养,并经过觳猓竦昧艘慌滩葑基因植株。其实验结果如下:咝е仓暝偕逑档慕苗龄烟草的叶片为再生能力较强的外植体,以为基本培养基,,出芽多,叶外植体平均出芽数为个;生长快,左右即可诱导出芽来。以培养基为基本培养基,从设计的一系列培养基中按效果筛选/Q康纳嘌蚀%,根系发达,呈本实验基本上建立了高效烟草植株再生体系,为更多外源目的基因的导入奠定了基础。滩菀糯;逑档慕敲顾厣秆∨ǘ鹊娜范由于所构建的植物表达载体携带有新霉素磷酸转移酶此以I秆∈约裂≡褡;赴Q滩菀镀庵蔡逶贙养基上能正常分化出芽,可保持绿色,与在疞的培养基上无明显差异;康挠盏经比较确定康纳出辐射状。颍/呐硕士论文根癌农杆菌介导的基因转化烟草的研究籰/
关键词:基因;疞的筛选条件下,叶片的分化受到抑制;ǘ任/保镀蠖嗍谆籏浓度为/保康姆只饰,叶片基本上白化,停止生长,不分化。故选用ǘ中增殖、分化培养的筛选浓度。┡└司榈嫉难滩莼蜃;坝跋熳;母饕蛩胤治在利用根癌农杆菌介导法进行烟草遗传转化的过程中,设置了菌液稀释倍数、浸染时间、预培养时间、共培养时间鲆蛩兀芯糠治稣庑┮蛩对遗传转化效果的影响。结果显示,采用预培养囊锻庵蔡澹ùτ谏长对数期的农杆菌菌液稀释于先天晚上接种于养基中,振荡培养—,共培养后移入加有羧苄青霉素/姆只嘌信嘌笥遥傻—的抗性芽,然后将抗性芽移入生根培养基,本实验对根癌农杆菌转化条件进行了较为系统的比较研究,旨在建立一种转化效率高、稳定性好、通用性较强的烟草农杆菌转化技术体系。;騊检测对烟草转化植株的检测主要采用椒āR钥剐灾仓甑淖蹹为模板,以质粒Q粜远哉眨晕醋;蛑仓晡R跣远哉眨猛庠基因的特异引物进行┰觯ü缬炯觳庥形蘩┰龀瞿康奶醮梢判断外源目的基因的存在与否。觳饨峁砻鳎糠盅泛脱粜远哉站┰龀鲈て诘奶匾炱危负对照亲;蛑仓结果为阴性,这证明了基因己转化并整合到烟草基因组中。经觳猓%的抗性植株为粜灾仓辍根癌农杆菌;遗传转化在’ǘ任/魑J匝腖禾迮疞和卡那霉素左右可得抗性苗。烟草;硕士论文根癌农杆菌介导的基因转化烟草的研究
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缩略词英文名称十六烷基溴化铵溴化乙锭黄

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