文档介绍：该【高效液相色谱的基本参数讲义课件 】是由【yzhluyin9】上传分享，文档一共【27】页，该文档可以免费在线阅读，需要了解更多关于【高效液相色谱的基本参数讲义课件 】的内容，可以使用淘豆网的站内搜索功能，选择自己适合的文档，以下文字是截取该文章内的部分文字，如需要获得完整电子版，请下载此文档到您的设备，方便您编辑和打印。色谱基本参数
§1保留值
(1)保留时间tr
保留时间tr和死时间t0示意图
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(2)保留体积
VR(ml)=tr(min)*Fc(ml/min)
VR=Vm+KVs
K--平衡分配系数,Vs--固定相体积,Vm=流动相所占体积
溶质在固定相中的浓度(ns/Vs)nsVm
K=----------------------------------=----*----
溶质在流动相中的浓度(nm/Vm)nmVs
ns,nm溶质在固定相和流动相中的量
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(4)容量因子(k’)
固定相中容质的量(ns)
k´=------------------------
流动相中容质的量(nm)
K=k´(Vm/Vs)
VR=Vm+KVs=Vm+k´(Vm/Vs)Vs=Vm+k´Vm
=Vm(1+k´)
tr=to(1+k´)k´=tr/to-1
k´与固定相,流动相性质及柱温有关;与流速,柱尺寸无关.
(3)调整保留时间
tr´=tr-toV=VR-Vm
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§2选择性指标(´)和相对保留值()
´=tr(2)/tr(1)=(1+k´(2)/(1+k´(1))
=tr'(2)/tr'(1)=k´(2)/k´(1)
´作为选择性指标比直观
与柱温固定相种类流动相组成有关
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§3-1流动相线速(u)
流动相线速u:通常指平均线速度
u=L/t。
u=Fc/A*εT
A:柱截面积
L和u一定时,t。一定
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§3-2柱总孔隙率(εT)
柱总孔隙率:柱横截面上流动相所占的分数,主要取决
于柱填料类型。
εT=Fcto/Vc
薄壳填料—
多孔硅胶—
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K0为渗透性常数(厘米2)
η为流动相黏度()
ΔP为柱压降(大气压X106或达因/厘米2)
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理论板高与线速的关系
H=A+B/u+Cu
A:涡流扩散项,B:纵向扩散项,C:传质扩散项
VanDeemter
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如果我们使用更小颗粒度的填料会发生什么情况?
HPLC填料颗粒尺寸的演变
10min
从80年代到现在
~5µm球形微多孔填料
1500~4000psi
50,000~80,000塔板数/米
×300mm
70年代末期
10µm不规则微多孔填料
1000~2500psi
25,000塔板数/米
×300mm
10min
70年代早期
40µm薄壳非多孔基质上涂布
100~500psi
1000塔板数/米
1m长色谱柱
10min
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vanDeemter曲线的提示
颗粒度越小柱效越高
颗粒度控制着分离的质量
更小的颗粒度:
使最高柱效点向更高线速度方向移动
有更宽的线速度范围
降低颗粒度不但可以增加柱效,同时也增加分离速度
vanDeemter曲线的挑战
如果填料的颗粒继续演变……
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