文档介绍：湖南师范大学
硕士学位论文
敬钊缨毛蛛***-Ⅷ的结构与功能研究及两种蜘蛛***cDNA克隆
姓名:胡喆
申请学位级别:硕士
专业:生物化学与分子生物学
指导教师:谢锦云;梁宋平
20050501
要摘通过分子筛、阳离子交换色谱和反相高效液相色谱分离得到一种新的多肽神经***,命名为敬钊缨毛蛛***~Ⅷ一Ⅷ,的快速扩增法得到了敬钊缨毛蛛***一Ⅷ的全长,结合氨—。此***分子由个氨基酸残基组成,其中霭腚装彼形成远蚣>搭扔攵舅匾虎茏瓒闲∈箅跎窬浑跫”瓯镜敬钊缨毛蛛毒中含有多种多肽神经***,研究得比较深入的有敬钊缨毛蛛***一的通道***;敬钊缨毛蛛***—虺艼且恢值缪姑趴啬仆ǖ酪种萍痢本文报道从敬钊缨毛蛛Ⅷ>獻分析表明该多肽分子量为.,利用基酸自动测序仪测定和全长的推导得到了敬钊缨毛蛛***一Ⅷ的氨基酸序列,序列为。一糔神经肌肉接头传递,并能阻断窬O赴系母仆ǖ馈本文还应用方法克隆了—蚃娜ǔ列。两种***的都编码一个由个氨基酸组成的信号肽区谖夜D鲜。浯狪,简称—,为一种抑制钙离子通道失活侄局校根据***的氨基酸序列设计并合成了疪’的引物,通过叠合疪’扩增的序列就得到了***蛋白的全序域,一个—个氨基酸残基组成的成熟蛋白区域和一个介于它们
关键词:敬钊缨毛蛛;虎纹捕鸟蛛;方法;中问的蚬餐钩傻那疤濉P藕烹氖嵌舅厮灿械男蛄校大量的碱性氨基酸。通过比较序列的相似性发现,一Ⅷ与—和、猇的高度相似。而—際猉膒区域高度相似。Ⅱ
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第一章蜘蛛***研究进展麻痹猎物,长效神经***用来抑制猎物的分鳃。坏死陛***及酶类可以分子量蛋白质***主要来源于黑寡妇蜘蛛嬲秙蜘蛛目是蛛形纲中仅次于蜱螨目的一大目,蜘蛛的起源最早从沙漠到热带雨林都有蜘蛛生存。全世界有近,郑夜笤加蛋白质、多肽、多***类神经***、酶、核苷酸、游离氨基酸、单***类以和受体,起着抑制、拮抗、阻断或激动、兴奋等调制作用。这些***在蜘蛛隶属节肢动物门,蛛形纲碇┲肽可追溯至志留纪晚期到泥盆纪中期,到了晚石炭纪,蜘蛛家族己经十分繁荣昌盛了。蜘蛛品种繁多,分布广泛。在各种陆地,从海滩到高种。蜘蛛通常以昆虫与哺乳动物为食,以蜘蛛毒液来麻痹和杀死猎物,同时蜘蛛毒液在消化过程中也有作用:快速作用的神经***用以让蜘蛛逐步消化猎物“蜘蛛毒液成分较多,不同种蜘蛛的毒液的成分不同,主要的成分为及无机盐等物质。R丫又┲攵疽褐蟹掷氩⒓ǔ瞿啤⒓亍⒏频壤胱通道和受体的配体蛋白与多肽类神经***,它们特异地作用于离子通道神经生物学、分子药理学和分子毒理学等领域得到广泛应用,对神经生和相对分子质量可分为两大类型:第一种是高分子量蛋白***,蛛毒中高这些***均含有个以上的氨基酸残基,分子量大于一个高分子量的***家族,其粗毒含有突触前神经肌肉接头传递阻断剂物学的发展与杀虫剂和工具试剂的开发有重要意义,如∞~等。蜘蛛主要产生各种作用于神经系统的神经***,按照它们分子结构第一章蜘蛛***研究进展
叻肿恿康鞍字识舅成分。“。另一种包括多肽类神经***和多***类神经***以多肽神经***洌蔷蠖嗍掷嘀┲攵疽褐离子通道***、钾离子通道***、***离子通道***、刺激神经递质的释放的***、影响胆碱能传导的***以及影响谷氨酸能转运的***。己有数百种蜘蛛***的一级结构得以阐明,并在通道水平对这些******的三维结构得以解析。近年来蜘蛛***结构与功能的研究进展较快,现分述如下:的蜘蛛之一,也是至今研究得最深入的蜘蛛毒“K且桓龈叻肿恿康***家族,其粗毒含有突触前神经肌肉接头传递阻断剂成分,能引起脊椎动物和无脊椎动物的各种神经递质的大量释放,。它们一般含有多个谢⑿纬啥喽远蚣到圆等。多肽类***,分子量在的主要成分。蜘蛛神经***按它们的作用方式分为:钙离子通道***、钠目前对蜘蛛***的研究主要集中在结构与功能的研究方面,结构生物学研究主要内容有:三维结构的分析,生物学功能及活性位点的探测,结构与功能的关系和基于结构与功能的分子设计与蛋白质工程等。至今黑寡妇蜘蛛属于球腹蛛科鞘澜缟隙拘宰钋而引起肌肉麻痹,是一种刺激神经递质释放的***。现已从黑寡妇蜘蛛粗毒中纯化得到一种作用于脊椎动物的驦涠拘很强,对小鼠的。为肛痥8枚舅啬茏饔糜诩棺刀锿淮デ耙神经递质大量释放,它的作用伴随着膜的去极化和魅胪淮デ澳┥摇。、。作用于甲壳动物的和肿饔糜诶コ娴猯￡一。它们都含约个氨基酸残基,有
肽结构域,含有—个氨基酸残基;《孤端结构域,包括个嚯纳窬舅道、瞬时外向图赝ǖ篮透萍せ罴赝ǖ馈啊啊S氲缪姑趴啬仆ǖ篮透仆与细胞骨架蛋自相联,参与变异和翻译过程。龟艽端结构域,包括血糖激素有关“