文档介绍：:;弧学位论文规范化基因剔除小鼠技术体系的研究盆盎巍塑遴王熬撞箜三墨医盘坐塑照生堑堂煎盟窒』洼立超壁整医堂攫±§月分类号研究生姓名指导教师姓名塑申请学位类别学位授予单位和日期二六年五月论文编号密级专业名称
摘要基因剔除小鼠的技术体系是生命科学研究,尤其是人类基因组计划和医学实验动物模型等领域所急需的关健技术。基因剔除小鼠的建立是一项复杂的系统工程,本研究对基因剔除小鼠技术体系的关键技术环节进行了完善和规范:优化了细胞的基本培养条件;应用条件培养液筛选、富集高嵌合潜能的细胞;成熟嵌合体的制备技术提高嵌合体的制备效率;改变胚胎的移植方式提高移植胚胎的产仔率等等,建立了一套高效的嵌合体制备体系。在此基础上,本研究还进行了小鼠糖皮质激素受体基因、核孔蛋白蚝统H旧逑孕砸糯投嗄疑霾』基因剔除小鼠的研究,并分别获得了嵌合鼠。本研究还进行了诱导型基因剔除小鼠配套的;蛐∈蟮闹票讣癈重组酶体外活性的检测。.;籺,.琺,.,觱籺,.
摘要基因剔除小鼠的技术体系是生命科学研究,尤其是人类基因组计划和医学实验动物模型等领域所急需的关健技术。基因剔除小鼠的建立是一项复杂的系统工程,本研究对基因剔除小鼠技术体系的关键技术环节进行了完善和规范:优化了细胞的基本培养条件;应用条件培养液筛选、富集高嵌合潜能的细胞;成熟嵌合体的制备技术提高嵌合体的制备效率;改变胚胎的移植方式提高移植胚胎的产仔率等等,建立了一套高效的嵌合体制备体系。在此基础上,本研究还进行了小鼠糖皮质激素受体基因、核孔蛋白蚝统H旧逑孕砸糯投嗄疑霾』基因剔除小鼠的研究,并分别获得了嵌合鼠。本研究还进行了诱导型基因剔除小鼠配套的;蛐∈蟮闹票讣癈重组酶体外活性的检测。.;籺,.琺,.,觱籺,.
导师签名:—据。哆乒学位论文作者签名:笕卦签字日期:汐月\签字日期:炒年拢签字日期:州年翴譬日学位论文作者签名:告飘独创性声明学位论文使用授权书声明本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作。除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。本人承担本声明的法律责任。本人完全了解第二军医大学有关保留、使用学位论文的规定,有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅。本人授权第二军医大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。C艿难宦畚脑诮饷芎笫视帽臼谌ㄊ、‘.
缩略词表英文缩写英文全称中文名称胚胎干细胞胚胎成纤维细胞乙二胺四乙酸无特殊病原体碱基对互丙氧鸟苷遗传霉素单纯疱疹病毒胸苷激酶白血病抑制因子非必需氨基酸新霉素抗性基因胎牛血清磷酸盐缓冲液二甲亚砜光密度十二烷基磺酸钠糖皮质激素受体规范化基因剔除小鼠技术体系的研究何志颖博士论文
核孔蛋白常染色体显性遗传型多囊肾病多囊肾病基因聚合酶链反应聚乙二醇核糖核酸酶三羌谆氨基甲烷何忐颗博上论义规范化基冈剔除小鼠技术体系的研究
摘要基因剔除小鼠的技术体系是生命科学研究,尤其足人类基因组计划和医学实验动物打靶载体的构建、细胞的培养及筛选、嵌和体的制备、胚胎移植、生殖系传递的检测、建系及表型分析等一系列前后衔接的工作,本研究旨在完善和规范基因剔除小鼠技嵌合潜能的细胞;成熟嵌合体的制备技术提『每嵌合体的制备效率;改变胚胎的移植方式提高移植胚胎的产仔率等等,以建立一套高效的嵌台体制备体系。在此基础上,奉肾病基因蛱蕹∈蟮难芯浚约坝盏夹突蛱蕹∈笈涮椎膃转基因小鼠的制糖皮质激素受体介导糖皮质激素在生理和发育上的作用十分复杂,涉及多个器官和系统,产生基因缺陷的基园工程小鼠作为相关研究的实验动物模型,对于该领域研究的深入和发展具有重要意义。本研究旨在采用低常⒂盏夹蛉毕菪∈竽P停佣苊饬伺咛シ⒂喙鼗虻奶蕹5贾滦∈笏烙诜畏⒂良而无法获得成体动物的缺点。同时我们开展了组成型基因剔除小鼠的研究,利用杂合了可存活的特点保种并研究纯台子胚胎致死的病理生理学改变。常染色体显十丰遗传是国内杨焕明教授克隆的新基因。相关基因剔除小鼠的建立将为相关基因细胞的基本培养条件是细胞体外培养的基础,对基本条件的掌握与优化是本研究的基础内容。本研究在培养试剂的配制与添加、滋养层细胞的制各及细胞的培模型等领域所急需的关健技术。基因剔除小鼠的建立是一项复杂的系统工程,其中涉及术体系的关键技术环节:优化细胞的基本培养条件;应用条件培养液筛选、宫集高研究还进行了小鼠糖皮质激素受体基凼、核孔蛋白蚝统H旧逑孕砸糯投嗄备及刈槊柑逋饣钚缘募觳狻型多囊肾病侵殖<牡セ蛞糯约膊。渲饕1硐治I瞿抑仔纬珊进行性增大,日前已知大约%的颊哂蒔槐湟稹