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31、园日涉以成趣,门虽设而常关。
32、鼓腹无所思。朝起暮归眠。
33、倾壶绝余沥,窥灶不见烟。
34、春秋满四泽,夏云多奇峰,秋月扬明辉,冬岭秀孤松。
35、丈夫志四海,我愿不知老。
前言
血清谷丙转氨酶活力的测定为一种较好的早期诊断肝炎的方法之一。其在临床上有重要意义:正常时,谷丙转氨酶主要存在于组织细胞内,以肝细胞含量最多,心肌细胞中含量其次,只有极少量释放入血中。所以血清中此酶活力很低。当肝脏、心肌病变、细胞坏死或通透性增加时,细胞内各种酶释放出来,使血清中此酶活性升高。所以测定血清中此酶的含量可作为诊断、鉴别诊断及预后观察的依据。本实验采用纸层析法和比色法探究动物免疫对血清成分含量的影响。
前言
分离、纯化与鉴定γ—球蛋白的方法很多,本实验用醋酸纤维素膜电泳法对蛋白质进行量化、比较及特性鉴定,是较为经济、快速且可重复的方法。本次血清清蛋白与γ-球蛋白的分离与鉴定覆盖了传统生化技术,包括离心技术、层析技术、分光光度法和电泳技术。

4号血清:由生命与环境科学学院生化试验室提供。从四只兔子分别提取血清用于生化实验,其中有一只兔子是有免疫的,其它的是未免疫的,血清提取出后置于冰箱冷藏。
(血清主要由水和各种化学成分组成,这些化学成分就包括白蛋白、α1、α2、β、γ-球蛋白,甘油三酯,总胆固醇,谷丙转氨酶。大量实验证明将血清密封放入-10℃冰箱中长时间保存,由于水分和这些化学成分没有变化,因此新鲜血清和-10℃保存一年的血清醋酸纤维素薄膜电泳后的血清白蛋白、α1、α2、β、γ-球蛋白的百分值无显著差异,两种血清的甘油三酯,总胆固醇,谷丙转氨酶也无明显差异。完全能满足实验的要求。这不仅不浪费血清,而且方便又节省实验经费)。
猪肝:由生命与环境科学学院生化试验室提供。几天前从菜市场买来置于冰箱里保鲜处理,到要用时取出(同上,冷藏对谷丙转氨酶影响不大)。

℃、37℃水浴箱

:邻苯二甲醛法
-球蛋白的分离与鉴定:盐析法分离提纯蛋白质、透析法脱盐与蛋白质浓缩、凝胶过滤层析、醋酸纤维素薄膜电泳法分离与鉴定血清清蛋白
:纸层析法、分光光度法测定血清丙转氨酶的活力
结果分析

图1血清总胆固醇标准曲线
图2兔子血清总胆固醇含量
由图2可知免疫兔子血清中胆固醇含量比未免疫的兔子低很多
样品
吸光度
胆固醇含量/mg
不免疫兔子血清

免疫兔子血清

凝胶层析洗脱结果
图3凝胶层析洗脱曲线图
由图3可知蓝色的蓝葡聚糖比黄色的***钾先流过凝胶柱,且蓝葡聚糖在第10管,即约流出197ml时,达到溶质数最大,即浓度最大;***钾在第24管,即约流出473ml时达到溶质数最大
全血清、清蛋白和γ-球蛋白电泳结果
纯化的γ-球蛋白样品为一条带(γ-球蛋白位置),正常兔子血清样品为五条带(清蛋白、α1、α2、β及γ-球蛋白)
上清液的迁移距离=
γ-球蛋白的迁移距离=
全血清中:
α-球蛋白的迁移距离=-球蛋白的迁移距离=
γ-球蛋白的迁移距离==
图4全血清、清蛋白和γ-球蛋白电泳谱图