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注射用银杏叶提取物的工艺研究.doc

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注射用银杏叶提取物的工艺研究.doc

文档介绍

文档介绍:注射用银杏叶提取物的工艺研究
更新时间:2005-7-20
银杏叶中含多种生理活性成分,如黄酮类化合物、萜内酯等,预防和治疗心、脑血管疾病和老年性痴呆具有良好的效果。银杏叶黄酮多为黄酮糖苷。已从银杏叶中分离出二萜内酯有5种,即银杏内酯 A,B,C,J和M,倍半萜内酯1种,即白果内酯(gink- golide)。
国内已开发上市的含银杏叶提取物的品种有固体制剂和注射液,目前市场上作者未见有供注射用的银杏叶提取物原料药,本试验针对其工艺进行了中式规模的研究,该工艺简便,适合于工业生产。试药与仪器
银杳叶为银杏科植物银杏Ginkgo biloba ,购于山东郑城,经检定,本品符合中华人民共和国药典2000年版一部银杏叶项下有关规定。槲皮素、白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯B、银杏内酯C均由中国药品生物制品检定所提供。
岛津LC-l0ATVP双泵,岛津SPD-10AVP 紫外-可见检测器。CLASS-VP色谱工作站。试剂:乙腈为色谱纯,乙醇为医用酒精,其他试剂为分析纯,水为重蒸水。ZFQ-971型旋转薄膜蒸发器。方法与结果
1 工艺过程
粗品制备
~%乙醇60℃温浸提取,提取2次,每次2h,合并提取液,回收乙醇至相对密度(~,50℃测),加
4倍叶重量的水,1~4℃冷藏放置8h,过滤。滤液上 DM130大孔吸附树脂柱,分别以3~4倍柱体积水、 3倍柱体积15%乙醇、70%乙醇洗脱,收集70%乙醇洗脱液,在温度为50~60℃,真空度-~- ,减压浓缩,真空干燥,得粗品。
精制过程
粗品粉碎,加5倍95%乙醇回流提取2次,每次15min,合并2次提取液,减压回收乙醇,浓缩,真空干燥后,加入8倍粗品重量的水,加热至沸,保持沸腾5min,放置室温,冷藏8h,过滤,滤液加入粗品 1/4的聚酰胺树脂(60~80目)搅拌5min,过滤,滤液在温度为50~60℃,真空度-~- 条件下,减压浓缩,真空干燥,粉碎成80目,即得注射用银杏叶提取物。
2 工艺路线考察
测定成分的选择和限度
银杏总黄酮和萜类内酯为银杏叶中主要活性成分,以HPLC测定其含量,可以有效反映工艺合理性,控制产品质量,限度为银杏总黄酮含量>24%;萜类内酯>6%。
测定方法的确定
参照国家药品标准WS-10001-(HD-0087)- 2002银杏达莫注射液和中华人民共和国药典2002年增补本银杏叶提取物含量测定方法,采用HPLC法测定银杏总黄酮、萜类内酯的含量。
银杏总黄酮色谱柱:AgilentZorbax SB - C18柱(250mm×,5μm);流动相:甲醇-% 磷酸溶液(50:50);流速
·min;检测波长为 360nm。-1
对照品溶液的制备精密称取槲皮素对照品约 6mg,置100mL量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀。供试品溶液的制备精密称取本品适量,加甲醇-25%盐酸(4:1)的混合溶液25mL,置水浴中加热回流2h,迅速冷却至室温,转移至50mL量瓶中,用甲醇稀释至刻度,摇匀,用微孔滤膜()滤过,取滤液,即得。
测定

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