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第 36卷第 7期辽宁化工 Vol. 36, No. 7
2007年 7月 L iaoning Chem ical Industry July, 2007
SDS - PAGE电泳技术分析蛋白质的研究
高艳利 1 , 杨思文 1 , 樊凯奇 1 , 陈静 2 , 王娟 1 ,
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(1. 沈阳化工学院, 辽宁沈阳 110142; 2. 东北大学, 辽宁沈阳 110004)
摘要: SDS - PAGE是分析蛋白质的一项技术,重点介绍了其原理、凝胶制备及染色方法,并对
双向电泳(2 - DE)和电泳后蛋白质鉴定方法进行了简单的介绍。
关键词: SDS - PAGE; 蛋白质; 染色
中图分类号: O 657 文献标识码: A 文章编号: 1004 0935 (2007) 07 0460 04
电泳是一种分离蛋白质和其他物质如核酸、还要根据被分离样品的相对分子质量大小设计相
嘌呤、嘧啶、一些有机化合物甚至无机离子的主要应的浓度的胶; PG - PAGE是按照凝胶孔径从上
方法或技术。目前的电泳大多是在固定化的介质至下不断减小的体系中,在电场力的推动下而移
中将样品放入流动相中进行分离,而不采用完全动的不同大小的蛋白质分子会在不同位置明显受
自由态的溶液进行分离。固体支持物的种类很阻而形成极窄的区带,从而提高分辨率。
多,如纸、乙酸纤维素、硅胶、氧化铝、琼脂糖、淀粉由于 SDS - PAGE在测定蛋白质分子量、检
及聚丙烯酰胺凝胶等。特别是聚丙酰胺凝胶电测特异蛋白、鉴定菌株种属[ 2 ] 等方面具有操作简
泳,由于它是一种多孔胶,其凝胶孔径与蛋白质分单、重复性好等优点是其它技术无法比拟的,脉冲
子大小接近,提高了对蛋白质的分辨能力。而且 SDS - PAGE和微型 SDS - PAGE 缩短了电泳时
聚丙烯酰胺凝胶质胶方便,代价低,机械强度、化间,减少了传统 SDS - PAGE因为电泳时间过长
学稳定性好,重复性强,对 pH 和温度变化稳定, 而产生的副作用,而同位素标记和荧光标记技术
非特异吸附和电渗多很小,凝胶透明,易于显色并的发展则提高了蛋白质的分辨率,使 SDS - PAFE
观察。除此之外,聚丙烯酰胺凝胶电泳与下一步更具实效性,因此 SDS - PAGE在许多实验室得
的蛋白质提纯和蛋白质鉴定方法如免疫印迹、质到广泛的应用。所以本篇文章主要以 SDS—
谱鉴定等兼容性较好,因而使得聚丙烯酰胺凝胶 PAGE为研究对象进行简单综述。
成为首选的蛋白质分离介质[ 1 ] 。 1 SDS - PAGE 分离蛋白质的基本
聚丙酰胺凝胶电泳有三种类型,等电聚焦- 原理
聚丙酰胺凝胶电泳( isoelectric focusing polyacryl SDS - PAGE首次由 Shap iro等提出后,已成
am ide gel electrophoresis, IEF - PAGE) 、十二烷基为广泛应用于蛋白质分离的一种方法[ 2 ] 。由于
硫酸钠—聚丙酰胺凝胶电泳( sodium dodecyl sul SDS是一种阴离子去污剂,在还原剂(β- 巯基乙
fate - polyacryam ide gel electrophoresis, SDS