文档介绍：专题5 DNA和蛋白质技术
课题1 DNA的粗提取与鉴定
?
细胞核中
,混合物中主要含有哪些成分?
DNA、RNA、多糖、蛋白质和脂质等
,获取DNA并鉴定,我们该怎样去除杂质呢?请阅读教材P54第1、2自然段,作出DNA和蛋白质等杂质在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度曲线。
溶解度
NaCl浓度

2mol/L
DNA
蛋白质
请同学们阅读教材P54第3、4自然段
请同学们归纳DNA和蛋白质在酒精中的溶解度差异及它们对酶、高温和洗涤剂的耐受性差异。
,细胞中某些蛋白质溶于酒精;
;
~80℃的高温,而DNA在80℃以上才会变性;
。
请同学们阅读教材P55第2自然段了解如何鉴定DNA?
在沸水浴条件下,DNA遇二苯胺会被染成蓝色
DNA粗提取与鉴定的实验步骤如下,请同学们思考为什么这样做?
(一)实验材料的选取
(二)破碎细胞,过滤
(三)去除滤液中的杂质
(四)DNA的析出
(五)DNA的鉴定
选用哺乳动物的红细胞作提取DNA材料不太合适的原因是什么?
哺乳动物的成熟红细胞中无细胞核及核物质,选用哺乳动物的红细胞作提取材料,DNA含量不高。
(鸡血细胞):加蒸馏水,搅拌,纱布过滤
思考:过滤后,DNA在纱布上还是滤液中?
(洋葱):切碎,加一定的洗涤剂和食盐,搅拌,研磨,纱布过滤
思考:a、加洗涤剂的目的是什么?
b、加食盐的目的是什么?
c、过滤后,DNA在纱布上还是滤液中?
方案一:,加NaCl(至浓度为2mol/L),过滤
思考:目的是什么?
,过滤
思考:怎样调节?该步骤的目的是什么?

思考:该步骤的目的是什么?
方案二:直接在滤液中加入嫩肉粉(含木瓜蛋白酶),反应10~15min
请同学们说说操作原理
方案三:将滤液放在60~70℃的恒温水浴箱中10~15min
请同学们说说操作原理
将处理后的滤液过滤,加入与滤液体积相等的、冷却的酒精溶液(V/V=95﹪),静置2-3min,然后用玻璃棒沿一个方向搅拌,卷起白色丝状物。
请同学们讲解实验原理