文档介绍：山东农业大学
硕士学位论文
水稻种子cDNA微阵列的分析及相关基因的表达与功能研究
姓名:王霞
申请学位级别:硕士
专业:植物学
指导教师:张宪省
英文缩略表缩写英文名称中文名称禽成髓细胞病毒逆转录焦碳酸二乙酯糖苷�讳逡�一***一�贿胚嵋籅—�话肴樘擒����吗啉代��撬�聚合酶链式反应***化钠、��.�、��溶液十二烷基硫酸钠标准柠檬酸盐溶液�卉谢�堰�奈乙酸��������培养基碱基对鲑鱼精��动子重蒸水二硫苏糖醇溴化乙锭大肠杆菌乙二***四乙酸葡萄糖苷酸酶异丙基一�狣一硫代半乳醋酸钠乙酰丁香***三羟***氨基甲烷���***苯氧乙酸����������酶牛血清蛋白花椰菜花叶病毒���互补��山东农业大学硕士学位论文�������,��.�,����猂������������籅���一����!猙�������������������������������������������一�猤����������一���一�籭���—�狣—����������������籦������‘
摘要以水稻�������爸谢��笔诜酆�一�天的种子为材料构建��文库,通过微阵列技术和表达序列标签法对文库进行筛选和分析,分离到与水稻种子发育过程中表达基因�肿又�氐鞍谆�蚝团咛シ⑸�***⒂���具较高同源性的克隆��觯�δ芪粗5目寺��个,向����峤籈�个。在此基础上对分离到的基因��蛅���辛吮泶镉牍δ苎芯俊������交结果表明,基因��饕T谑诜酆��熘肿拥呐呒笆诜酆髄�臁��臁���种子的胚乳中表达,而在根、叶等营养器官中表达量较低:基因��辉谑诜酆�天的种子、授粉后�天种子的胚及授粉后�天、�天、�天种子的胚乳中表达。分别构建基因��蚏�的反义表达载体����猂�和�������进行了农杆菌介导的水稻愈伤组织遗传转化。目前,��和���鸦竦靡欢ㄊ�康淖�基因植株,基因的功能鉴定工作正在进行之中。关键词:水稻,��微阵列,����虮泶铮�糯�;���觯�⒉峄��王霞:水稻种子��微阵列的分析及相关基因的表达与功能研究�
水稻种子的发育��促进苗端分生组织形成���水稻是人类的重要粮食作物之一,其种子作为主要食用部分,积累了大量的淀粉、蛋白质和脂肪等贮藏物质。同时,水稻作为基因组最小的单子叶植物,由于再生转化系统已建立且具有高密度的连锁图,己成为研究禾本科作物发育、遗传和分子生物学的模式植物。随着基因组计划的不断进展,利用功能基因组学的理论和手段,研究水稻种子胚、胚乳生长发育和物质代谢调控的分子机理愈来愈重要。种子的发育始于精卵细胞之结合,经胚胎发生,贮藏物质的积累,至最后阶段的成熟干燥,整个过程充满了基因按特定程序在不同组织中的不同表达。因此种子不仅是研究植物生理和生化的重要对象,更是探索基因表达及调控的优良试材。随着水稻的开花、授粉,胚珠在完成双受精后便开始了其种子的发育历程。;受精极核形成初生胚乳核,初生胚乳核发育形成胚乳,珠被形成种皮,子房壁形成果皮,整个子房形成一粒果实——糙米。水稻胚胎发育经原胚、梨形胚至成熟胚。授粉后�天左右,胚的各器官建立即基本完成。整个胚由两大部分构成:胚轴系统,包括胚芽、胚轴、胚根及其根冠;胚套,由盾片,左、右腹鳞片,外胚叶及胚根鞘连成。目前,对于胚胎发育的研究热点主要集中在拟南芥、水稻、玉米和豌豆等植物上。结合分子生物学和遗传学的手段就胚极性的表达、胚柄的发育潜能及细胞的分化与决定等问题的探讨,已使我们对胚胎发生及建成有了较深入的理解。这些进展大部分是基于对各种胚胎突变体的分析,如�����蛟谀饽辖嬖缙谂咛バ纬墒北泶铮�赡茉谠缙谂咛バ翁��界中起作用����蛭V肿映墒焓�所必需,��槐涮宓呐卟荒苣褪芡阉�饔����制协调高等植物胚胎发育的主要转录因子:在玉米胚胎发育过程中,������.,����谒�局兴�耐�匆煨��.,���严嗉瘫豢�隆,这些基因在苗形成前协同作用形成苗端分生组织,当茵形成后再分别行使不同的功能。尽管目前已分离到一些胚胎发育特异表达的基因,但对于其确切功能及基因间相互作用还知之甚少。水稻胚乳为核形胚乳,其发育过程可分为核期和细胞期。核分裂结束后胚乳细胞壁才开始出现,而此时,内部的细胞亦已开始贮藏物质的积累�芫ê��天,胚乳细胞内便有淀粉粒的出现�E呷樽魑5鞍字省⑻抢嗪椭�嗟闹�嫫鞴伲�涔��.,����没�蚴强�基因��������.,�����������.,���籐����闒山东农业大学硕士学位论文������
功能基因组学研究基因。植物界中克隆的第一个基因一一种子贮藏蛋白基因即云扁豆蛋白能是为发育中的胚和萌发的种子提供养料。在种子发育过程中,绝大部分的��是种子贮藏蛋白的��。这些基因多为超丰度表达,是一类典