文档介绍：核酸疫苗与寄生虫核酸疫苗的研究进展论文
关键词: 核酸疫苗;寄生虫病
【摘要】本文较为详细地叙述了核酸疫苗的优点、作用机理,简略介绍了核酸疫苗在疟疾、血吸虫病、囊虫病和利什曼原虫病的应用与研究进展。
【Abstract】 Many advantages and principles of nucleic acid ine alaria, schistosomiasis, cysticercosis and leishmaniasis entioned briefly.
【Key s等发现注入基因在体内表达的蛋白质可诱导免疫应答[5]。 1992年Tang等的实验证实了artinon等将编码甲型流感病毒NP的mRNA用脂质体包封后直接经皮下和静脉内注入体内,有效地激发了抗病毒特异性的细胞毒性T细胞效应,而且mRNA翻译产生的NP蛋白能根据相应的MHC I型分子被加工成不同的抗原多肽[8]。应当强调的是,mRNA并不能代替DNA疫苗,它不具备DNA的所有优点。其表达短暂而不能诱导长期的免疫力。另外,mRNA不如DNA稳定,其生产、贮存、运输所需费用都比DNA高。而质粒DNA性质较稳定,易于提取和保存,在体内表达时间长并可诱发较强的免疫应答,故更常用。与灭活疫苗、减毒活疫苗和重组基因工程疫苗不同,常用核酸疫苗的化学性质为双链环状DNA。对于其免疫机理,目前还不能完全诠释,只有根据实验资料推测与如下几方面有关。
核酸疫苗在骨骼肌细胞表达的外源抗原由抗原提呈细胞(APC)提呈注射核酸疫苗后三天即可通过免疫组化方法检测到肌细胞表达的外源蛋白质抗原[9],但肌细胞并不能表达激活T细胞所必需的第二信号-B7[10],不能进行抗原提呈。动物实验结果表明,核酸疫苗在嵌合体小鼠诱导CTL应答受供骨髓小鼠MHC限制,嵌合体小鼠的骨骼肌细胞不能提呈抗原,只有供者骨髓细胞来源的APC才能提呈抗原[11]。对严重联合免疫缺陷BALB/c小鼠分别肌注HIV、HSV核酸疫苗,三周后移植CB6F1小鼠脾细胞和骨髓细胞,小鼠能产生H-2b和H-2d限制性CTL,证明骨骼肌细胞来源的抗原能被CB6F1小鼠骨髓细胞中的APC吞噬、加工、活化CTL前体细胞[12]。
核酸疫苗直接转染APC 以任何途径(皮肤、粘膜、肌肉等)接种核酸疫苗,都可能直接转染专业APC,如巨噬细胞、树突状细胞。核酸疫苗在APC内表达的蛋白质抗原作为“内源性抗原”,经胞浆内的蛋白酶降解成8~10个氨基酸组成的肽,被内质网膜上的抗原肽转运结构转入内质网腔,与MHCI类分子形成聚合体,经高尔基体到达APC膜表面,被T细胞的受体识别,这是诱导CTL应答最有效的途径。APC在肌肉组织分布较少,但极少量APC被转染即能诱导免疫应答,不到200个树突状细胞被核酸疫苗转染即可诱导抗体产生和CTL应答[13]。
核酸质粒的免疫佐剂功能近年发现细菌DNA本身也是一种免疫佐剂,可有效地激活免疫效应细胞。介导这一作用是一类具有特征性的短核苷酸序列,被称作免疫刺激DNA序列(Immuno-stimulatory DNA sequence,ISS)[14,15]。对DNA 的分段研究分离出一些引起NK细胞激活的ISS,这些序列绝大部分是由胞嘧啶核苷酸和鸟嘌呤核苷酸为基元的寡聚体,其碱基排列大多遵循