文档介绍：第十一章

化学发光和荧光免疫技术及仪器
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第一节化学发光免疫分析技术
第二节电化学发光免疫分析
第三节时间分辨荧光免疫分析法
第四节荧光偏振免疫分析法
第五节化学发光免疫分析的临床应用
内容概述:
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教学目标和要求

掌握化学发光免疫分析技术的基本原理、反应的底物和标记方法以及反应类型。
熟悉电化学发光免疫分析的基本原理和标记物,时间分辨荧光免疫分析法的基本原理及其标记物和螯合物。
了解荧光偏振免疫分析法的基本原理和技术特点,化学发光免疫分析的临床应用
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第一节化学发光免疫分析技术
基本原理
反应的底物
标记方法
反应类型
相关仪器
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一、基本原理
化学发光,是指伴随化学反应过程所产生的发光的发射现象。某些物质在进行化学反应时,吸收了反应过程中所产生的化学能,使反应物分子形成电子激发态,当电子从激发态返回到稳定的基态时,多余的能量就以光子的形式发射出来。这一现象称为化学发光。
A + B C* + D, C* C + h
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(一)产生化学发光反应的条件和过程
化学发光与荧光的区别:
化学能光能
化学发光反应的条件:
反应必须提供足够的激发能焓变(△H)介于170~300 kj·mol-1 之间,才能在可见光范围观察到化学发光现象
吸收了化学能后处于激发态的分子或原子,必须以光子形式将能量释放出来,或者将能量转移到另一种物质的分子上并使该分子激发,当被激发的分子回到基态时,也以光子的形式释放能量
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(二)化学发光效率
化学发光反应的发光效率(φCl)又称为化学发光总能量的产生率
φCl取决于生成激发态产物分子的化学激发效率
(φCE) 和激发态产物分子的发射效率(φEM)。
一般化学发光反应,φCl值约为10-6
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(三)强度与反应物质浓度之间的关系
反应物的浓度
反应速度
化学发光反应所发出的光的强度
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(四)化学发光的反应类型
直接化学发光间接化学发光

化学反应释放的化学能激发的是反应产物分子
A + B C* + D, C* C + h
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(敏化的化学发光)
在化学反应中,激发能传递到另一个未参加化学反应的分子上,使该分子达到电子激发态,再由激发态分子返回到基态时发光;或反应首先生成一种高能量的中间体,此中间体再将能量转移给另一个未参加化学反应的分子,使该分子达到电子激发态,再由激发态分子跃迁回到基态时发光的过程。
A + B C* + D , C* + F F* + E, F* F + h
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