文档介绍：苦丁茶对五种细菌的体外抑菌试验论文
陈源红,唐华英,韦连登,林小海,覃学辉,梁昌丽
【摘要】目的探讨苦丁茶对五种常见细菌的体外抑菌效果。方法用琼脂扩散法和试管稀释法测定苦丁茶汤剂对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、变形杆菌、白色念珠菌、新生隐球菌五种病原菌的体外抑菌作用。结果苦丁茶对所测病原菌的最小抑菌浓度(MIC)为:金黄色葡萄球菌100mg/ml, 表皮葡萄球菌50mg/ml,变形杆菌100mg/。结论金黄色葡萄球菌对苦丁茶均呈中度敏感,表皮葡萄球菌对苦丁茶呈高度敏感,变形杆菌对苦丁茶呈低度敏感,白色念珠菌、新生隐球菌对苦丁茶均呈耐药。
【关键词】苦丁茶;细菌;微生物敏感性试验
苦丁茶又名皋卢、瓜卢,是一种纯天然绿色饮品。远在东汉时的《桐君录》(已经遗失)中就曾记载作为贡品供皇家享用。民间记载具有清热解毒、消炎利便、解酒功能,对咽喉肿痛、口腔炎、牙龈炎、便秘等疾病效果显著[1~3],但其药理学研究不多,我们研究了苦丁茶的抗菌作用,现报告如下。
1 实验材料
试验药物
苦丁茶水煮浓缩液。药物制备:100g苦丁茶加10倍量蒸馏水小火煮沸2次,每次1h,合并2次水煮液,四层纱布过滤,浓缩至100g/100ml,~,4℃冰箱保存备用。
菌种
所用菌种为金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、变形杆菌、白色念珠菌、新生隐球菌(由中国药品生物制品鉴定所提供,其中金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌为耐青霉素类药物菌株)。菌种的培养及菌液的配制: 金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、变形杆菌用MH琼脂平板培养,37℃培养18h;白色念珠菌、新生隐球菌用沙保弱琼脂平板培养,28℃培养48~72h备用。。
培养基制备
MH琼脂按平板常规方法制备:MH琼脂38g/蒸馏水1000ml;MH肉汤按常规方法制备:MH肉汤27g/蒸馏水1000ml;沙保弱琼脂培养基制备:沙保弱琼脂27g/蒸馏水1000ml。
试验器材
打孔器、高压蒸汽灭菌器、冰箱、恒温培养箱、无菌工作台等。
2 试验方法
本试验同时采用琼脂扩散法和试管稀释法用苦丁茶对各菌株进行抑菌试验,观察苦丁茶对五种病原菌的抑菌效果。
琼脂扩散法
用灭菌棉签蘸取供试菌液(),均匀涂布于MH琼脂平板上,然后用直径6mm的琼脂打孔器均匀打孔,每板4孔,去除孔内琼脂并适当封闭孔底。将供试药液加于孔中,以满而不溢为宜并作好标记,并且以MH肉汤作为阴性对照。置4℃冰箱中作用1h后取出。金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球、变形杆菌置于37℃恒温箱中培养18~24h,白色念珠菌、新生隐球菌28℃培养48h,观察结果。
试管稀释法
取无菌试管6支, MH肉汤,2~5管加入1ml MH肉汤。,混匀后吸取1ml加入第2管中,依次倍比稀释至第5管弃去1ml,第6管加入2ml MH肉汤作为对照管。每管加入菌液50μl。细菌37℃培养18~24h,真菌培养48~72h后观察结果。能够完全抑制细菌生长的最小药物浓度为最小抑菌浓度(MIC)。
3 实验结果
琼脂扩散法实验结果