文档介绍：湖北中医药大学本科生毕业论文
题目:PCR方法在ApoE基因敲除小鼠
基因型鉴定中的应用
姓名:
学号:
专业: 生物技术
年级: 2008级
实习单位: 武汉大学心血管病研究所
指导老师:
完成日期: 2012 年 5 月 1 日
PCR方法在ApoE基因敲除小鼠基因型鉴定中的应用
作者肖明瑶指导者张艳
摘要目的为ApoE基因敲除鼠探索快速、简单的基因型PCR检测方法。方法设计两对引物扩增野生型 ApoE基因和ApoE缺陷突变基因的DNA片段,用PCR仪梯度方案测试最佳退火温度,然后用PCR鉴定方案检测小鼠基因型并将所得基因型结果与已经过经典的 Southern blot方法检测得到的基因型结果比较。结果野生型仅在155 bp处有一条条带,突变纯舍子仅在245 bp处有一条条带,杂合子则在155和245bp处出现两条条带。用PCR方法获得的ApoE基因分析结果与经典的Southern blot方法获得的结果完全一致。结论用PCR方法分析ApoE基因敲除鼠的基因型具有快速、简单、廉价和适用的特点。
关键词聚合酶链反应基因型基因打靶载脂蛋白E
Genotype identification of ApoE Gene Knockout Mice with Polymerase Chain Reaction
Objective This study was to explore a simple and quick polymerase chain reaction(PCR)method for genotyping of ApoE knockout Two pairs of primers were designed to amplify genomic DNA fragment of wild-type ApoE gene and the same region on ApoE targeting veceor gradient PCR strategy was used to test the best annealing temperature. Results A 155bp band was found in wild-type ApoE mice,a 245 bp band in homozygous mutated ApoE mice and both bands in hetemzygous genotyping results pletely coincided with those from typical Southern blot. Conclusion PCR is a simple,fast and practical method for the genotyping of ApoE gene knockout mice.
Key words Poiymerase Chain Reaction genotype gene targeting ApoE
载脂蛋白(apolipoprotein,ApoE)是清除乳糜微粒和极低密度脂蛋白的受体的配体,因此,缺乏ApoE则会导致血液循环中富含