文档介绍：上海第二医科大学
硕士学位论文
耐糖肽类抗生素肠球菌检测和基因分型
姓名:应春妹
申请学位级别:硕士
专业:临床检验诊断学
指导教师:倪语星
界的重视¨谝淮请睦嗫股匾灰煌蚬琶顾厥窃谖迨甏缙谟蒃和替考拉宁诙。第三代糖肽类抗生素——阿佛帕星在欧洲等耐糖肽类抗生素肠球蕾检测和基因分型国家主要用于畜牧业,作为动物的饲料。由于万古霉素和替考拉宁对革兰阳性菌具有广谱的抗菌活性,。在以后的四十多年中,又发现了另外株产糖肽类抗生素的放线菌,其中广泛应用于临床的糖肽类抗生素主要是万古霉素糖肽类抗生素抑制革兰阳性菌细胞壁的合成。主要作用于细胞合成而导致细菌死亡。肠球菌对糖肽类抗生素的耐药性主要是由于细菌获得了编码一系列酶的基因而使肽聚糖生物合成的途径发生改变,造成肽聚糖前体的改变,从而降低了对万古霉素和肽可霉素的亲和力‘8荻万古霉素和肽可霉素的耐药程度及耐药性的可诱导活性,目前可分耐万古霉素肠球菌的检测主要有药敏试验、琼脂筛选法和分子中文摘要引起严重感染的最有效的抗生素。年在欧洲发现了第一例耐万古霉素的屎肠球菌,从此肠球菌对万古霉索耐药的情况引起了全世为、、和四种获得性表型和型天然耐药表型‘。
生物学方法陟薄R┟羰匝橛兄狡┥⒎ê虴试验法。分子生物学法包括多重测序等方法。本研究通过琼脂筛选法筛选可疑辏肊试验和多重钥梢蒅菌株进行、、.蚔瓹基因检测,并用多重和庑蚍治鯲湍鸵┗颍粤私釭临床分离株的耐药性及型幕蚍中秃土餍胁⊙А萍龅那碇秆》ㄉ秆〕昕梢蒅,包括攴喑η菌,晔撼η蚓株鹑鸡肠球菌和昵瞥η蚓S肊试验检测郧嗝顾亍⑺幕匪亍避星嗝顾亍⒒繁承恰⒗F健⑼古霉素和替考拉宁的弥狡ㄉ秆中出现氨基糖苷类高水平耐药肠球菌Ⅱ。邗0访傅难粜月省6钥梢蒅。=峁瓿η蚓杏株屎肠球菌对万古霉素和替考拉宁均高度耐药崾疚猇,,用菌株用多重椒ḿ觳馄淠鸵┗、、—性。多重峁允株屎肠球菌为型,有晡獀型,晡猇/停氡硇图觳庀喾A株基因型不明,
测序,有助于发现新的耐药基因或新的突变位点。、喂馕南妆ǖ溃鲂腁株对万古霉素低水平耐药的肠球菌州。琼脂筛基因检测,并用和庑蚍椒ń斜冉希粤私獾水平耐万古霉素肠球菌基因分型及临床型肠球菌耐药情况。。检测结果:瓿η蚓允株单链片段与参考菌株一致,甑チ雌斡隫参考菌株一致,,:株鹑鸡肠球菌与闢参考菌株相比,有%的同源性。株铅黄肠球菌与闢参考菌株相比,也有的同源性。本实验建立了琼脂筛选法筛选头肿由镅如多重和觳釭耐药基因等实验方法。从炅俅卜掷的肠球菌中检测出甓酝蚬琶顾睾吞婵祭叨饶鸵┑氖撼η蚓选法操作简便,可作为某跎甘匝椋籈试验可精确分析肠球菌对万古霉素和替考拉宁的酝撇釭不同耐药表型;多重可同时检测肠球菌中耐糖肽类抗生素常见的耐药基因;甋可用于分析耐药基因的不同单链,以找出不同的基因片段,结合俅卜掷氲难粜月食什欢仙仙魇疲谑笛槭一姑挥邢低筛选某9娣椒ê湍鸵┗蚣觳夥椒ā=⒉⑵兰奂觳夂脱芯椒ǎ晌A俅参⑸锸铱U钩9婕煅镚提供参考,并为监测院内牧餍泻湍鸵┗虻姆中痛蛳禄
关键词:耐糖肽类抗生君弘球菌切㈧多重小、/.一
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考拉宁诙。第三代糖肽类抗生素——阿佛帕星在欧洲等国家言第一代糖肽类抗生素——万古霉素是在五十年代早期由发现。在以后的四十多年中,又发现了另外株产糖肽类抗生素的引等从印度尼西亚的土壤标本中分离出的一株产万古霉素的放线菌中放线菌,其中广泛应用于临床的糖肽类抗生素主要是万古霉索和替主要用于畜牧业,作为动物的饲料。由于万古霉素和替考拉宁对革兰阳性菌具有广谱的抗菌活性,因而被认为是治疗革兰阳性菌引起严重感染的最有效的抗生素。直到年,在欧洲发现了第一例耐万古霉素的屎肠球菌,肠球菌对万古霉素耐药的情况引起了全世界肠球菌对万古霉素的耐药性主要是由于细菌获得了编码一系列酶的基因而使肽聚糖生物合成的途径发生改变,造成肽聚糖前体的改变,从而降低了对万古霉素和肽可霉素的亲和力。根据对万古霉素和肽可霉素的耐药程度及耐药性的可诱导活性,目前可分为、、和四种获得性表型和型天然耐万古霉素肠球菌的检测主要有药敏试验、琼脂筛选法和分子生物学方法。药敏试验有纸片扩散法和匝榉ā7肿由镅Хò括多重测