文档介绍:上海第二医科大学
硕士学位论文
同种异体猪软骨细胞免疫学特性的初步研究
姓名:柳子星
申请学位级别:硕士
专业:免疫学
指导教师:葛海良
的软骨细胞对淋巴细胞增殖作用。迥谑笛椋航阒砣砉窍赴同种异体猪软骨细胞免疫学特性的初步研究、\、、/⒑鰿种异体移植物应用于人体组织和器官的修补和替代提供理论依据。四周取材。对标本进行大体观察,并应用组织病理学观察移植物和宿主免疫反应特点和免疫组化观察移植物的表达水平。肿樱槐泶颩中文摘要目的分离制备小型猪的软骨细胞,通过对其培养生长的特点和表面标志的分析以及同种异体猪软骨细胞移植的体内外研究,了解移植物的免疫学性状和免疫排斥的机制,并探索有效的免疫干预手段,为同方法体外实验:首先分离制备猪软骨细胞并用对其表面标志类、进行分析。建立测试软骨细胞抗原的软骨细胞淋巴细胞混合反应体系的培养条件;测定不同猪龄的软骨细胞和版纳猪淋巴细胞混合反应情况。观察被猋诱导表达类分子表达变化。以及用大鼠的一基因转染大鼠软骨细胞,舛ㄆ结果体外实验:发现从分离的细胞数量和质量上幼年的猪软骨细胞均优于成年猪的软骨细胞。检测表明猪的软骨细胞猪的软骨细、。在建立猪的软骨细胞和淋巴细胞的反应测试体系中发现异种血清ヅQG对猪的淋巴细胞有强烈的刺激作用。三组不同猪龄的香猪的软骨细胞对同种异体猪婺芍刺激均较弱。未发现软骨细胞分泌混合,接种到版纳猪的皮下,分别于移植后的第一、二、胞仅表达的、
类抗原,而挥莈基\/能性作初步的探讨。丫细胞转基因效率和克服猪软骨细胞移植排异提供实验依据。的上清或软骨细胞有抑制园婺芍淼牧馨拖赴碳ぁ一丫诱导殖。体内实验:三组软骨细胞移植的受体猪在第一周即出现腹股沟淋分子。体内同种异体第三天为痬1臼笛槲;蛐奘蔚娜砉窍赴谖蠢匆浦仓械目类分子,提示体内被迅软骨细胞表达分子能明显促进软骨细胞刺激淋巴细胞的增巴节肿大。第四周淋巴节肿大开始消退。组织病理学检查发现在第一周即有大量的淋巴细胞的浸润,第四周移植物均被吸收。免疫组化显示被移植的软骨细胞已被诱导性地表达软骨细胞被迅速排异,可能与软骨细胞被诱导性表达类分子有关。,在结论猪软骨细胞的抗原性仅表达而移植的软骨细胞体内被诱导性表达速排异可能与软骨细胞被诱导性地表达真核载体的构建、转染大鼠软骨细胞和表达为下一步如何提高猪软骨关键词:软骨细胞;同种异体移植;喾肿樱硐纸先蹩乖浴类分子有关。.
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自体软骨细胞移植虽已经用于临床并取得良好的效剁¨。但由于其造种间的特异性和共同性。有人发现型胶原对软骨细胞非常重要,在转软骨细胞分泌胶原ィ谖宕敝徽糽%投嗑厶前匪娲细胞的功能口R虼瞬豢赡苡锰逋饫┰龅酱罅康淖陨淼娜砉窍赴葱薷创块软骨组织缺损。而同种异体软骨细胞移植能弥补种子细胞来源的困难。型、偷取S捎谙宋舷赣牖实恼酃饴室恢拢贖旧ǖ谋瓯局等特殊染色。胶原具有物基因的小鼠,发现缺乏胶原导致蛋白水平的降低和软骨细胞的凋亡【俊;视傻鞍锥嗵呛退钩伞G罢咭粤蛩崛砉撬睾土蛩峤侵仕匚V鳎数的增加而逐渐减少。院螅砉窍赴鲋臣趼鱿置飨缘摹胺捶化”现象,形成如成纤维细胞的形状【俊艽碳と砉窍赴铣啥嗑前言成新自体的创伤和种子细胞来源的困难限制其应用。而软骨细胞在体外培养随着代数的增加,出现如成纤维样的“反分化”现象,失去了软骨但是避免免疫排异是同种异体软骨细胞移植的目前面临的主要问题。软骨组织由软骨细胞和细胞间质组成。细胞间质由纤维和基质组成,胶原纤维一般平行于表面排列。胶原中以型胶原为主和少量的不易显示,。软骨细胞分泌间质形成软骨陷窝将自身包埋起来。由于这一特点,软骨组织被认属于免疫豁免区。经过胶原酶处理后的软骨组织分离出游离的软骨细胞,处理的软骨细胞在小时就能恢复表达型胶原。在体外培养的软骨细胞~般成多遍形或星形。糖胺。视紫红素能刺激软骨细胞使其出现“反分化”现象】。上海第二医科大学硕士论文
圭查蔓三匡型盔堂堡主堡墨——近年来,不同实验室所报道不同动物的软骨细胞表型有所不同。在肿樱琁但未检测到、俊】壳氨冉弦恢率侨等也证明游离软骨细胞能够刺激宿主免疫反应,但是完整的这因为软骨细胞周围致密的基质形成屏障,软骨细胞处于免疫豁免区状如乖叵挡淮蟆俊目前猪的软骨细胞移植的报道,主要集中在自体移植。由于猪和人的亲缘性较近,人的许多细胞和组织器官同猪的相仿,且猪的软骨细胞状,探讨同种异体移植排斥的机制,为探索软骨细胞组织工程化提供依据和临床应用开辟新的途径。本实验主要对胚胎、幼年和成年猪的软骨小鼠的软骨细胞表达子的软骨细胞表达分子嘲。但人的软骨细胞仅表达的软骨细胞在某些情况下诱导性地表达同种异体软骨移