文档介绍：实验五血红蛋白含量的测定、血型鉴定
实验目的
掌握血红蛋白的测定方法;
学****鉴定血型的基本方法,观察红细胞凝集现象,掌握ABO血型鉴定的原理。
测定血红蛋白的意义
人血红蛋白参考值成年男性:13--15克/dl ;成年女性:11--14克/dl ;儿童:(依年龄而异)12--14克/dl。
临床意义:大致与红细胞增减相似。高原地区居民的血红蛋白浓度一般比平原居民为高,这是机体对低气压环境的一种适应现象。一般来说,在疾病状况下,血红蛋白的增减是与红细胞的改变相平行的,即引起红细胞增多的疾病,也会使血红蛋白含量增加。使红细胞减少的疾病,也使血红蛋白含量减少。在贫血时,血液中的红细胞数量和血红蛋白浓度都有不同程度的下降,但不一定按相同的比例变化。有时红细胞数量可以减少很多,而血红蛋白的浓度的降低却相对地不那么显著,见于大细胞性贫血,由于单个红细胞所含的血红蛋白量较正常者为多。相反,也有的红细胞减少得不很多,而血红蛋白浓度却显著降低,例如缺铁性贫血,这是由于每个红细胞的血红蛋白含量比正常明显减少,故血红蛋白减低的程度较红细胞减少更为显著。依据检验结果,分析病因,做到准确的诊断和治疗都是很必要的。
基本原理
血红蛋白是红细胞的主要成分,在正常情况下,每个红细胞均含有一定量的血红蛋白。血红蛋白是由珠蛋白和亚铁血红素组成的结合蛋白质。血红蛋白除能与氧结合形成氧合血红蛋白外,尚能与某些物质作用形成多种血红蛋白衍生物。它们具有特定的色泽和吸光谱,在临床上,可用以诊断某些变性血红蛋白血症和血红蛋白的定量测定。
测定血红蛋白含量的方法很多,实验常用比色法。其原理是在一定量的血液中,血红蛋白经少量盐酸的作用,使亚铁血红素变成高铁血红素,呈现较稳定的棕色。用水稀释后与标准色比较,求出每100ml血液中所含的血红蛋白克数。,。
实验原理-血型鉴定
血型一般指红细胞的血型,是根据红细胞膜外表面存在的特异性抗原(镶嵌于红细胞膜上的糖蛋白和糖脂)来确定的,这种抗原或凝集原是由遗传决定的。
抗体或凝集素存在于血清中,与红细胞的不同抗原起反应,产生凝集,最后溶解,由于这种现象,临床上在输血前必须注意鉴定血型,以确保安全输血。
ABO血型鉴定实验原理
抗原抗体反应——在ABO血型系统中,红细胞膜上抗原分A和B两种抗原,而血清抗体分抗A和抗B两种抗体。A抗原加抗A抗体或B抗原加抗B抗体,则产生凝集现象→从而测知受试者红细胞膜上有无A或/和B抗原→判断血型
IgM抗体凝集红细胞示意图
IgM抗体凝集红细胞示意图
IgGM在盐水介质中产生凝集
实验材料
血红蛋白计、;
载玻片、刺血针、牙签、一次性采血管、A型和B型标准血清、生理盐水、酒精棉球等。
方法与步骤-血红蛋白测定
。
取20μl被检血液, 迅速将吸血管插入测定管底部盐酸液中,缓慢挤出血液,再吸取上部清液,反复冲洗吸血管2~3次,并混匀,静置10min。
沿着管壁加入蒸馏水,逐步稀释至与标准色柱色调一致后,读取重量(或百分)刻度值报告结果。
标准制换算:血红蛋白(g/L)=血红蛋白(g/dl)×10