1 / 3
文档名称:

实验十四 血清胆固醇测定(胆固醇氧化酶法).doc

格式:doc   大小:35KB   页数:3页
下载后只包含 1 个 DOC 格式的文档,没有任何的图纸或源代码,查看文件列表

如果您已付费下载过本站文档,您可以点这里二次下载

分享

预览

实验十四 血清胆固醇测定(胆固醇氧化酶法).doc

上传人:镜花水月 2018/10/22 文件大小:35 KB

下载得到文件列表

实验十四 血清胆固醇测定(胆固醇氧化酶法).doc

文档介绍

文档介绍:实验十四血清胆固醇测定
(胆固醇氧化酶法)
胆固醇的测定方法很多;通常可分为化学试剂比色法、酶法、气相色谱法、高效液相色谱法、核素稀释质谱法五大类。化学试剂比色法中有直接法和间接法;前者可用血清直接测定,后者是用溶剂或其它方法提取胆固醇后再作定量。酶法由于操作简便、结果准确,试剂无腐蚀性,而且因使用特异性酶,大大减少了血液中其它成分的干扰,目前已成为测定胆固醇的主要方法。
【目的】
,能进行血清胆固醇测定的操作。

【原理】
血清中总胆固醇(TC)包括胆固醇酯(CE)和游离型胆固醇(FC),酯型占70%,游离型占30%。胆固醇酯酶(CEH)先将胆固醇酯水解为胆固醇和游离脂肪酸(FFA),胆固醇在胆固醇氧化酶(COD)的作用下氧化生成Δ4-胆甾烯酮和过氧化氢。后者经过氧化物酶(POD)催化氢与4-氨基安替比林(4-AAP)和酚反应,生成红色的醌亚胺,其颜色深浅与胆固醇的含量呈正比,在500nm波长处测定吸光度,与标准管比较可计算出血清胆固醇的含量。反应式如下:
【器材】
试管、吸管、试管架、微量加样器、恒温水浴箱、分光光度计。
【试剂】
酶法测定胆固醇多采用市售试剂盒。
1. 酶应用液胆固醇酶试剂的组成为:
50mmol/L
胆固醇酯酶≥200U/L
胆固醇氧化酶≥100U/L
过氧化物酶≥3 000U/L
4-氨基安替比林 mmol/L
苯酚 5 mmol/L
此外还含有胆酸钠和Triton X-100,胆酸钠是胆固醇酯酶的激活剂,表面活性剂Triton X-100能促进脂蛋白释放胆固醇和胆固醇酯,有利于胆固醇酯的水解。
2. mmol/L(200mg /dl)胆固醇标准液
精确称取胆固醇 200mg溶于无水乙醇,移入100ml容量瓶中,用无水乙醇稀释至刻度(也可用异丙醇等配制)。
【操作】
取试管3支,编号,按下操作。
表3-15 酶法测定血清胆固醇操作步骤
加入物(ml)
测定管
标准管
空白管
血清

-
-
胆固醇标准液
-

-
蒸馏水
-
-

酶应用液




混匀后,37℃水浴保温15分钟,在500nm波长处比色,以空白管调零

最近更新

上海市民营企业人才问题分析 6页

一例猫感染泛白细胞减少症诊治的体会 4页

《零食多店企业人员招聘现状及问题和对策(开题.. 5页

二零二五年度智能硬件产品供货商合作协议 9页

《企业薪酬管理问题研究开题报告文献综述(含提.. 6页

二零二五年度新能源车辆运输承包协议 9页

XX企业员工福利研究[任务书] 5页

L公司知识型员工激励体系优化设计的开题报告 4页

二零二五年度房屋租赁合同租赁合同争议解决法.. 8页

A公司知识型员工激励问题研究的开题报告 4页

二零二五年度工地食堂员工培训与技能提升承包.. 9页

二零二五年度客服培训师劳动合同 8页

二零二五年度太阳能光伏电站工程安装与运营维.. 9页

2025年南京林业大学010家居与工业设计学院140.. 5页

2025年人力资源毕业论文范文大全 5页

二零二五年度商业地产购房合同转让及经营许可.. 9页

二零二五年度双方合作合同:人工智能教育平台.. 8页

(乳酸和ScvO2的关系) 5页

二零二五年度债务和解与新能源技术研发合作协.. 8页

二零二五年度交通事故责任认定及赔偿协议书 7页

二零二五年度2025年度酒店式公寓租赁合同全新.. 9页

中小学多功能厅装修协议 9页

2025年度高端酒店大堂艺术贴砖设计合同 10页

2025年度食品冷链配送承包合同 9页

2025年度蔬菜批发市场运营与管理销售合作协议.. 9页

2025年度能源项目咨询居间费未签合同纠纷解决.. 8页

2025年度网络安全服务利润分红协议 8页

2025年度篮球场设施租赁与赛事推广服务合同 9页

鉴赏中国古代诗歌的思想情感 19页

2025年度甲方乙方新能源汽车充电桩运营合作协.. 10页