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人呼吸道合胞病毒M蛋白非复制型重组腺病毒的构建和鉴定(可复制论文).pdf

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人呼吸道合胞病毒M蛋白非复制型重组腺病毒的构建和鉴定(可复制论文).pdf

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文档介绍:中英文缩略词表两安徽医科大学硕士学位论文英文缩略词英文全称中文名称氨基酸腺病毒氨卞青霉素牛血清自蛋白题细胞病毒十二烷基硫酸钠增强化学发光过硫酸铵网甲基乙二胺玎乙二胺四乙酸溴化乙锭碱基对千碱基对埃希氏大肠杆菌改良培养液反转重复序列开放阅读框三羧酸甲基氨基甲烷最’,
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人呼吸道合胞病毒鞍追歉粗菩椭刈橄俨《镜构建和鉴定中文摘要目的人呼吸道合胞病毒琑惴悍植加世界各地,是导致婴幼儿严重下呼吸道感染的最重要的病毒病原。目前尚无特异性防治方法,世界卫生组织将发展呙缌形W钣畔确⒄沟囊呙珑锸裰弧值鞍字校琑的基质蛋白琈俏挥诓《景つ诓躬结构蛋鑫,在《拘翁⑸暇哂兄匾獅搴羽,同时对宿主缨胞的转录具有抑制作用。为进一步开展鞍椎墓δ苎芯考把扒驲疫苗研制的新方法,我们克隆了虿⑼瓿闪丝杀泶颮白缘姆聘粗菩椭刈橄俨《镜墓菇ḿ鉴定。方法根据编码鞍椎幕蛐蛄猩杓埔铮ü齊狿从感染腍一细胞中扩增获得白曰颍寺〉絧甌载体审,序列测定正确焉,将其亚克隆到真核表达载体。中,并进行酶切鉴定,脂质体法转染细胞,应用方法分析虮泶锴榭觥O拗菩阅谇忻复觩疢中切下蹋的基因强寺≈料俨《敬┧笾柿竦弥刈榇┧笾柿疢。酶切鉴定后,咝曰痯/玫绱┛追ㄗ;际酰严咝詐/,获得重组腺病毒质粒疪C盖屑ㄕ玻訮盖衟/,脂质体法转染细脆。待出现典型的细胞病变效应,后,取细胞裂解液,以鉴定目的基因表达。结果重组表达载体./南拗菩阅谇忻阜治鼋峁朐て谝恢拢安徽医科大学硕士学位论文
蛎挥蟹⑸抟逋槐洹WH綜一赴螅琖鞍椎姆歉粗菩椭刈橄俨《綟疪捎糜谔迥谘安徽医科大学硕士学位论文序列分橱显示分析观察到鞍滋匾煨缘谋泶锾醮V刈榇┧笾柿/椭刈橄俨《局柿疪盖屑ㄕ贰/以盖泻螅弥侍宸ㄗH细胞,观察到细胞出现肳分析,检测到虻谋泶铩结论成功克隆切蚏株颍⒃谡婧讼赴谢竦帽泶铩;竦靡株可表达切蚏究观察其免疫效果及免疫保护作用。关键词:人呼吸道合胞病毒鞍譝真核表达非复制型重组腺病毒
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人呼吸道合胞病毒鞍追歉粗菩椭刈橄俨《≡褐瘟疲ǚ..构建和鉴定把人和病人为剧,据统计,在婴幼儿%的毛细支气管炎和两岁前%肺炎是由引起的,是导致婴幼儿严重下呼吸道感染的最重要的病毒病原【C拦蚨生一次碌拇镄苑窝妆⒘餍校斐烁腥荆人住院,出率为%;门诊标本份,粜份,阳性检出率为%。疗方法,预防仍是全球性的目标,因此,发展一种安全、有效的呙缡强蒲安徽医科大学硕士学位论文惴悍植加谑澜绺鞯兀腥巳航钥筛腥荆悦庖吡Φ拖碌挠び锥⒗腥镜淖≡悍延妹磕旮叽..诿涝#矣懈腥臼氛叻喂δ芊⑸砸斐#住院儿童约%在年后会发生支气管哮喘;另外,老人和免疫缺陷病人也是美元【俊N夜本┑厍年间,对个病毒性呼吸道感染婴幼儿患者进行觳猓渲ナ怯筛貌《疽鸬摹】。年~年期间先后在我国广州、山西、北京以及河北和天津等地形成了未罅餍小】,年津冀地区发人死亡【俊孪愀郯怖显汉陀锥行谋┓⒘艘淮渭甯腥尽月~年拢私嗟取慷员本┑厍例标本进行检测,有份为阳性,》勘瓯荩琑阳性份,阳性检起的呼吸道疾病对家庭和社会带来很大负担,迄今为止,腥救晕抻行У闹工作者的首要任务之一【俊粲诟别げ《究疲窝撞《臼簦5ス筛毫碦病毒。蜃楣编码种蛋白,其中包膜鞍缀虶蛋白在动物模型中能诱导中和抗体和保护性免疫应答的产生【俊K荝结构蛋白中变异最显著的蛋白,根据鞍装被序列的差异,将治狝、礁隹乖切蚮啦】。
琈俏挥诓《景つ诓嗟慕峁沟鞍祝赗病毒形态发生上具有重要作用,同时对宿主细胞的转录具有抑制作用【N=步开展鞍椎墓δ苎芯考把扒驲疫苗研制的新方法,我们克隆了基因并首先用技术得到白缘谋嗦牖颍雙克隆载体连接,测序正确后,噩克隆入.,用、技术验证因的转录和表达,再亚克隆到腺病毒穿梭质粒,获得重组腺病毒穿梭质粒,然后细胞内进行腺病毒骨架质粒与重组穿梭点和转染跋赴档冉徊讲僮鳎钪盏玫娇杀泶颩蛋白的非复制型腺病毒重组体,并耀检测到白缘谋泶铩鞍椎姆歉粗菩拖俨《局刈樘宓某晒菇ǎ=ú浇刑迥免疫学效果和免疫学保护作焉的研究奠定了基础。幕实鞍完成了可表达鞍椎姆歉粗菩椭刈橄俨《镜墓菇ḿ凹ā在生长周期短,便于操作的甤载体的同源重组,经过对重组腺病毒质粒酶切分析、去除重组质粒的原核复制原可表达安徽医科大学硕士学位论文
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