文档介绍：博士学位论文重庆医科大学小发卡结构状:贤蜒鹾嗣缚购粑篮习病毒实验研究崔玉霞儿科学俅裁庖杨锡强教授重庆医科大学附届儿童医院免疫室博年士分类号密级论文豚目作者姓名指导教师姓名俺啤⒌ノ幻申请学位级学科、专业名称论文答辩年月塞』:§
指导教师签名:尬丕么学位论文作者鼢率圣盈魄迸:垒:丝论文作者签名:簦至整塑豪堑重庆医科大学研究生学位论文独创性声明学位论文版权使用授权书期:本人申明所呈交的论文是我本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得重庆医科大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料,与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。申请学位论文与资料若有不实之处,本人承担一切相关责任。本人完全了解重庆医科大学有关保护知识产权的规定,即:研究生在攻读学位期间论文工作的知识产权单位属重庆医科大学。本人保证毕业离校后,发表论文或使用论文工作成果时署名单位为重庆医科大学。学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅。学校可以公布学位论文的全部或部分内容C苣谌莩,可以采用影印、缩印或其他手段保存论文。日
免疫细胞化学干扰素流感病毒培养基含卡那霉素的感染复数信使核糖核酸四甲基偶氮唑盐硝酸纤维素核苷酸光密度开放阅读框架寡核苷酸纯化聚丙烯酰胺凝胶电泳磷酸盐缓冲液聚合酶链反应空斑形成单位苯甲基磺酰氟酆厦涪騃转录后基因沉默盏汲聊春衔核糖核酸扇核糖核酸酶每分钟转数呼吸道合胞病毒逆转录,籨,重庆医科大学博士研究生学位论文猙—猧
重壅垦型奎兰堕主堡塞竺兰垒笙兰——続髓逆转录一聚合酶链反应耐热酆厦三羟甲基氨基甲烷核酶严重急性呼吸器官综合症十二烷基磺酸钠短发夹状小干扰。猘
小发卡结构状:贤蜒鹾嗣缚购粑合胞病毒实验研究摘要屯蜒鹾嗣,珼技术是能够有肿瘤及病毒感染的研究。随着分子生物学和分子病毒学的发展,尤其和复制中起着重要作用,为了从基因水平阻断腥荆狙芯空攵瑂闹刈橹柿⒃谙赴嘌低彻鄄煨》⒖第一部分小发卡结构状饔冒械愕难≡窦霸靥逯柿干扰的靶点,根据纳杓圃颍杓坪凸菇ㄕ攵訰基因呼吸道合胞病毒甊窃斐墒澜绶围内婴幼儿及成人呼吸道感染的首位病毒病原,迄今为止尚没有针对腥镜目煽恳呙绾椭瘟埔┪镂适溃琑干扰效抑制目的基因表达的两种基因治疗策略,已被广泛用于基因功能、是对病毒基因结构和功能的研究取得长足进步,基因水平特别是基因转录后水平阻断病毒复制成为当前研究热点。基因在淖B基因设计、构建表达小发卡结构状结构状筊活性以及联合脱氧核酶治疗对粗频囊种菩应,为利用基因治疗防治腥镜难芯康於ɑ 的构建与鉴定目的:选择在B几粗浦衅鹬匾W饔玫腗蜃魑猻的小发卡结构状刈橹柿#@肦际跻种芌复制奠,重庆医科大学博士研究生学位论文课题资助渠道:国家自然科学基金
,和,可利用重组质粒进一步研第二部分的筛选、细胞毒性及转染效率观察目的:将成功构建的重组质粒//转染细胞,,的影响及空斑实验检测味缺浠杂行е柿=谐醪定基础。方法:利用在线杓乒ぞ撸攵訰基因序列选择并设计危院蠫表达序列和启动子的质粒魑T靥迥0澹τ没蚩寺〖际酰ň嘶鹦纬苫ゲ顾链的喜迦雙载体的启动子后端,构建成泶镌靥澹;疍菌株,提取重组质粒进行酶切鉴定和测序分析。结果:将设计合成的纬晒寺≈猎靥迳希盖屑安庑鉴定为目的序列。结论:成功构建了针对騧个重组质粒究訰的抑制效应,为蚋稍ぱ芯康於ɑ 初步筛选有效重组质粒,评估重组质粒的转染效率、细胞毒性以及病毒感染前后给药的区别,以便为进一步深入研究筊效应奠定基础。方法:利用脂质体刈橹柿WH綡术一胞,倒置荧光显微镜下观察绿色荧光细胞发生率以评估转染效率;利用光镜观察重组质粒对翲一赴”湫立筛选,并通过四甲基偶氮唑盐壬笛榧觳庵刈橹柿6哉结果:当重组质粒被转染细胞螅怪糜ü庀晕⒕迪细胞的毒性作用和在腥厩昂笥靡┑那稹重庆医科大学博士研究生学位论文
观察可见每种质粒转染的细胞中均出现大量的泶铮矣ü獗泶钥纱锒丁豢瞻咝纬墒笛榧觳庵刈橹柿6圆《镜味鹊挠跋欤第三部分在细胞培养系统抑制вΦ氖笛檠芯抗钚裕J褂肦干扰技术抑制粗铺峁┦笛榛『屠较强,绿色荧光细胞发生率达%以上;显微镜下逐日观察细胞病变情况,发现当哉兆镃达保琾组仅发生轻微细胞病变,而弛处理组细胞病变只稍有减轻,结果显示重组质粒山档蚏滴度,但、效果较明显,/病