文档介绍：蝿氯化钠法:取3mL精练棉子油,加入3mL正己烷,芈加入3mLNaCl(#L-1),继续于旋转搅拌器上振荡混合1h;12000r#min-1离心20min,使有机相和水相分离,小心取出下层水相;加入与水相溶液等体积的异丙醇,轻缓颠倒混匀,室温放置40min后,12000r/min-1离心20min,弃上清液,保留沉淀;待沉淀稍微干燥后用1mLTE溶解沉淀,加入1mL异丙醇,轻缓颠倒混匀,室温放置10min,后,12000r#min-1离心20min,弃上清液,保留沉淀;待沉淀稍微干燥后加入60LLTE,充分溶解沉淀,2min过后generaybiotech琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒(离心柱型)GK204150次(仅进行纯化部分),最后将离心获得的溶液(经核酸蛋白浓度检测仪检测浓度)取5微升进行琼脂糖凝胶电泳,同时可作为PCR反应的模板[5-6]。建议一个PCR反应使用1微升DNA。芄纯化部分:,估计重量螃或精确称量重量。,蚈于50~60℃水浴3~5min,期间每2~3min间断轻微羅颠倒混匀,直至胶块完全融化。薀注:为操作方便,可统一加入400μlBindingSolution。-3u肇中,室温放置2min,6,000rpm室温离心1min,取出螅吸附柱GC-3u,并倒掉收集管中废液。-3u重新放回收集管中,加入500µlWA莈Solution,于12,000rpm,室温离心1min,倒掉收集管蒆中废液。-3u重新放回收集管中,加入500μlWash蚃Solution,于12,000rpm,室温离心1min,倒掉收集管蚀中废液。。-3u重新放回收集管中,12,000rpm,室蒀温离心1min,之后,打开吸附柱GC-3u的盖子,室温袈放置5~10min或50℃放置3~5min,以彻底去除Wash莅Solution。-(用户自薁备),对膜中央悬空加入25~30μlElutionBuffer,盖膁好盖子,37℃放置2min,12,000rpm离心1min,离聿心管中的液体即为包含目的DNA片段的溶液。蒃PBS和正己烷法:取500ml精炼大豆油加入500ml正己烷,在磁力搅拌器中充分混匀,4h;加入1000mlPBS缓冲溶液在磁力搅拌器中充分混匀,6h;12000×g离心20min,小心取出下层水相;加入(NH)4SO4沉淀过夜。12000×g离心20min,保留沉淀;在沉淀薃中加入800µlH2O,充分溶解沉淀后,加入等体积的酚和氯仿抽提,12000×g离心10min,取上清,加入二倍体积的无水乙醇,4℃20min,12000×g离心10min,保留沉淀,自然风干后,加入50µl水溶解沉淀,电泳定量。艿SDS法:待检样品的制备[2],颠倒混匀5min,室温下离心13000r/min3min,去除上层油脂层;再次向同一支管中加入1mL蒈食用油,颠倒混匀,离心,去除上层油脂层,反复20次。取水相用于提取DN