1 / 4
文档名称:

四种提取花生DNA的方法.doc

格式:doc   大小:21KB   页数:4页
下载后只包含 1 个 DOC 格式的文档,没有任何的图纸或源代码,查看文件列表

如果您已付费下载过本站文档,您可以点这里二次下载

分享

预览

四种提取花生DNA的方法.doc

上传人:乘风破浪 2019/4/5 文件大小:21 KB

下载得到文件列表

四种提取花生DNA的方法.doc

文档介绍

文档介绍:蝿氯化钠法:取3mL精练棉子油,加入3mL正己烷,芈加入3mLNaCl(#L-1),继续于旋转搅拌器上振荡混合1h;12000r#min-1离心20min,使有机相和水相分离,小心取出下层水相;加入与水相溶液等体积的异丙醇,轻缓颠倒混匀,室温放置40min后,12000r/min-1离心20min,弃上清液,保留沉淀;待沉淀稍微干燥后用1mLTE溶解沉淀,加入1mL异丙醇,轻缓颠倒混匀,室温放置10min,后,12000r#min-1离心20min,弃上清液,保留沉淀;待沉淀稍微干燥后加入60LLTE,充分溶解沉淀,2min过后generaybiotech琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒(离心柱型)GK204150次(仅进行纯化部分),最后将离心获得的溶液(经核酸蛋白浓度检测仪检测浓度)取5微升进行琼脂糖凝胶电泳,同时可作为PCR反应的模板[5-6]。建议一个PCR反应使用1微升DNA。芄纯化部分:,估计重量螃或精确称量重量。,蚈于50~60℃水浴3~5min,期间每2~3min间断轻微羅颠倒混匀,直至胶块完全融化。薀注:为操作方便,可统一加入400μlBindingSolution。-3u肇中,室温放置2min,6,000rpm室温离心1min,取出螅吸附柱GC-3u,并倒掉收集管中废液。-3u重新放回收集管中,加入500µlWA莈Solution,于12,000rpm,室温离心1min,倒掉收集管蒆中废液。-3u重新放回收集管中,加入500μlWash蚃Solution,于12,000rpm,室温离心1min,倒掉收集管蚀中废液。。-3u重新放回收集管中,12,000rpm,室蒀温离心1min,之后,打开吸附柱GC-3u的盖子,室温袈放置5~10min或50℃放置3~5min,以彻底去除Wash莅Solution。-(用户自薁备),对膜中央悬空加入25~30μlElutionBuffer,盖膁好盖子,37℃放置2min,12,000rpm离心1min,离聿心管中的液体即为包含目的DNA片段的溶液。蒃PBS和正己烷法:取500ml精炼大豆油加入500ml正己烷,在磁力搅拌器中充分混匀,4h;加入1000mlPBS缓冲溶液在磁力搅拌器中充分混匀,6h;12000×g离心20min,小心取出下层水相;加入(NH)4SO4沉淀过夜。12000×g离心20min,保留沉淀;在沉淀薃中加入800µlH2O,充分溶解沉淀后,加入等体积的酚和氯仿抽提,12000×g离心10min,取上清,加入二倍体积的无水乙醇,4℃20min,12000×g离心10min,保留沉淀,自然风干后,加入50µl水溶解沉淀,电泳定量。艿SDS法:待检样品的制备[2],颠倒混匀5min,室温下离心13000r/min3min,去除上层油脂层;再次向同一支管中加入1mL蒈食用油,颠倒混匀,离心,去除上层油脂层,反复20次。取水相用于提取DN

最近更新

2025年虫害检测新技术寄生虫快速识别法 39页

2025年脊髓损伤护理要点深度解析与实战查房 27页

2025年度金融服务业客户服务人员劳务聘用及劳.. 8页

2025年形容春分的文案200句 28页

2025年度跨境电商商家合作协议书模板系列 9页

电子产品分销区域代理合同 8页

2025年度购房信息查询与报告委托合同 8页

2025年社区肺炎抗生素治疗攻略 39页

环保领域外包工程合同范本 6页

环保治理设施建设合同 7页

2025年开展2025学校志愿者活动总结 8页

2025年度美容美发学徒实习就业合同 7页

2025年度网络安全防护团队聘用合同书 9页

教育权力结构的文化分析-全面剖析 20页

物流配送合作合同范本 6页

2025年开学校长领导讲话稿精选范文五篇 12页

2025年度绿色建筑示范区临时用地土地复垦整治.. 9页

物业零星维修服务合同 6页

2025年急性肠胃炎防治知识与护理要点 14页

二年级上看图写话课件 25页

物业服务合同样本范文 6页

2025年度科技企业经营权承包研发合作协议 9页

2025年建筑工程工作总结范文 14页

2025年度电子竞技劳动合同模板与行业规范 8页

(完整版)小学生必背古诗词80首 2页

计算机专业毕业论文3000字 6页

市政道路监理细则[1] 26页

CNAS-EL-03《检测和校准实验室认可能力范围表.. 10页

2024年高考英语听力(天津卷)AB卷试题及答案 5页

山东省2020年普通高中学业水平等级考试(模拟卷.. 9页