文档介绍：(1).浓盐法利用RNP和DNP在电解溶液中溶解度不同,将二者分离,常用的方法是用1M氯纳提取化钠抽提,得到的DNP粘液与含有少量辛醇的氯仿一起摇荡,使乳化,再离心除去蛋白质,此时蛋白质凝胶停留在水相及氯仿相中间,而DNA位于上层水相中,用2倍体积95%,再以1MNaCL提取脱氧核糖蛋白,再按氯仿---,,加入适量去污剂,如SDS可有助于蛋白质与DNA的分离。在提取过程中为抑制组织中的DNase对DNA的降解作用,,,并称SSC溶液,提取DNA.(2).阴离子去污剂法:用SDS或二甲苯酸钠等去污剂使蛋白质变性,,因为阴离子去污剂能够破坏这种价键,所以常用阴离子去污剂提取DNA.(3).苯酚抽提法:苯酚作为蛋白变性剂,,由于蛋白与DNA联结键已断,蛋白分子表面又含有很多极性基团与苯酚相似相溶。蛋白分子溶于酚相,而DNA溶于水相。离心分层后取出水层,多次重复操作,再合并含DNA的水相,利用核酸不溶于醇的性质,用乙醇沉淀DNA。此时DNA是十分粘稠的物质,可用玻璃漫漫绕成一团,取出。此法的特点是使提取的DNA保持天然状态.(4).水抽提法:利用核酸溶解于水的性质,将组织细胞破碎后,用低盐溶液除去RNA,然后将沉淀溶于水中,使DNA充分溶解于水中,%乙醇,%٠80%和95%乙醇以及丙铜洗涤,最后在空气中干燥,,,,提出来后放-20度冰箱,如果常用的话可以分装后低温保存,避免反复冻融。提取的时候使DNA变性没听过这一说,只可能是你加过裂解液DNA从细胞里释放出来后剧烈振荡了,那样会使DNA链断开的,EDTA就是保护DNA用的,NACL是提纯的时候用的,适量浓度的氯化钠可以使DNA在酒精中溶解度降到最低而使其形成沉淀,同事可以滤去蛋白质,后面要用75%酒精多洗几遍来去除NACL,不然OD比值会偏高。乙醇就是用来沉淀DNA的,也可以用异丙醇来沉淀,后面要用无水乙醇洗