文档介绍：川茸嗪对谷氨酸损伤海马神经元的保护作用【摘要】目的观察川茸嗪对谷氨酸损伤海马神经元的保护作用。方法原代培养大鼠海马神经元,培养基中加入lmmol/L的盐酸川苇嗪溶液共同孵育12h后,加入lmmol/L谷氨酸损伤海马神经元20mino采用MTT法检测细胞活性;测定培养液中乳酸脱氢酶(LDH)活力的变化;细胞免疫组化检测各组细胞表达AchEo结果川茸嗪可提高谷氨酸损伤后海马神经元的存活率,抑制因谷氨酸损伤引起的细胞内LDH的释放,可促进谷氨酸损伤细胞中AChE的表达。结论川茸嗪对谷氨酸诱导海马神经元损伤有保护作用。【关键词】川苇嗪;谷氨酸;海马神经元:ObjectiveToobservetheprotectiveeffectsofligustrazineonglutamateinducedinjuryinculturedhippocampalneurons・MethodsPrimarilyculturedhippocampalneuronsfromfetalratsmol/L)for12hours,thenglutamate(lmmol/L),,)、二甲亚W(DMSO)、L多聚赖氨酸、阿糖胞莒为美国Sigma公司产品;胰蛋白酶、DMEM培养基为美国Gibco公司产品;胎牛血清为杭州四季青有限公司产品;6孔板/II96孔板为丹麦Costar公司产品;乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒为南京建成生物工程研究所产品;其他试剂均为国产分析纯。Olympus倒置相差显微镜(日本),CO2培养箱(NAPCO公司),酶联免疫检测仪(美国BIOTek公司),兔抗大鼠AchE抗体(1:1000)、羊抗兔IgG(l:200)、ABC及DAB显色试剂盒(美国VECTOR公司)。[2]健康孕15d的SD大鼠,麻醉后无菌条件下取胎鼠脑,解剖显微镜下取出的双侧海马,去除脑膜和血管,°C消化10min,用完全培养基(90%DMEM+10%FBS)终止消化,制成单细胞悬液,调整细胞密度接种于多聚赖氨酸包被的24孔/96孔细胞培养板,置于50mL/LCO2、饱和湿度、37°C培养箱中培养。12h后加入阿糖胞昔抑制胶质细胞的过度增殖,以后每周换液2次,每次换1/2培养液。培养至神