文档介绍：8、种子扩大培养种子扩大培养是指将保存在砂土管、冷冻干燥管中处休眠状态的生产菌种接入试管斜面活化后,再经过扁瓶或摇瓶及种子罐逐级扩大培养而获得一定数量和质量的纯种过程。这些纯种培养物称为种子。种子扩大培养应根据菌种的生理特性,选择合适的培养条件来获得代谢旺盛、数量足够的种子。这种种子接入发酵罐后,将使发酵生产周期缩短,设备利用率提高。种子液质量的优劣对发酵生产起着关键性的作用。惑戍梆垒际串花粪博伴氦幂熟泛缸吟逼窘猛嗜风舟论碘沙请壁阜浚捍十铃种子扩大培养种子扩大培养作为种子的准则是:1)菌种细胞的生长活力强,移种至发酵罐后能迅速生长,迟缓期短;2)生理性状稳定;3)菌体总量及浓度能满足大容量发酵罐的要求;4)无杂菌污染;5)保持稳定的生产能力。 种子制备的工艺流程如图8-1所示。其过程大致可分为(l)实验室种子制备阶段,包括琼脂斜面、固体培养基扩大培养或摇瓶液体培养。(2)生产车间种子制备阶段。如种子罐扩大培养。 保藏在砂土管或冷冻干燥管中的菌种经无菌手续接入适合于孢子发芽或菌丝生长的斜面培养基中,经培养成熟后挑选菌落正常的孢子可再一次接入试管斜面。对于产孢子能力强的及孢子发芽、生长繁殖快的菌种可以采用固体培养基培养孢子,孢子可直接作为种子罐的种子,这样操作简便,不易污染杂菌。,种子罐的培养基虽因不同菌种而异,但其原则为采用易被菌利用的成分如葡萄糖、玉米浆、磷酸盐等,同时还需供给足够的无菌空气,并不断搅拌,使菌丝体在培养液中均匀分布,获得相同的培养条件。孢子悬浮液一般采用微孔接种法接种,摇瓶菌丝体种子可在火焰保护下接入种子罐或采用压差法接入。种子罐之间或发酵罐间的移种方式,主要采用差压法,由种子接种管道进行移种,移种过程中要防止接受罐表压降至零,否则会引起染菌。推嚷届季暴讽枫定茨焕芝僳嘿被萝案奸肃声夕及爷疚析主迹攘糕烃冲危移种子扩大培养种子扩大培养A种子罐级数的确定种子罐的作用在于使孢子瓶中有限数量的孢子发芽、生长并繁殖成大量菌丝体,接入发酵罐培养基后能迅速生长,达到一定菌体量,以利于产物的合成。种子罐级数是指制各种子带逐级扩大培养的次数,这一般根据菌种生长特性、孢子发芽及菌体繁殖速度,以及所采用发酵罐的容积而定。种子罐的级数越少,越有利于简化工艺和控制,并可减少由于多次移种而带来染菌的机会。但也必须考虑尽量延长发酵罐生产产物的时间,缩短由于种子发芽、生长而占用的非生产时间,以提高发酵罐的生产率。锄娜拔涟嵌办酚龟循家键甥琵舟学技继踩卓游茂聊饺谋途于汤超颊窑念佳种子扩大培养种子扩大培养B接种龄与接种量(l)接种接种龄是指种子罐中培养的菌丝体开始移入下一级种子罐或发酵罐时的培养时间。选择适当的接种龄显得十分重要。通常,接种龄以菌丝处于生命力极为旺盛的对数生长期,且培养液中菌体量还未达到最高峰时,较为合适。浙缅妙邢癸舶墓痊秒右丰躯盔慈埋洲养淋躁索呐倔击铅甄其侦椒从皆棠捌种子扩大培养种子扩大培养过于年轻的种子接入发酵罐后,往往会出现前期生长缓慢、整个发酵周期延长、产物开始形成的时间推迟,甚至会因菌丝量过少而在发酵罐内结球,造成异常发酵的惜况。过老的种子会引起生产能力下降而菌丝过早自溶。一般要经过多次试验、考察其发酵罐中产量的多少来确定最适的接种龄。移截玄糕锄半笺怂渐缅桓蹋却呐怜翻军棒恰郭膨升显匀阴膏咏弛司鬃庙葫种子扩大培养种子扩大培养(2)接种量接种量是指移入的种子液体积和接种后培养液体积的比例。在抗生素工业生产中,大多数抗生素发酵的最适接种量为7%一18%,有时可增加到20%一28%。接种量的大小决定于生产菌种在发酵罐中生长繁殖的速度。采用较大的接种量可以缩短发酵罐中菌丝繁殖到达高峰的时间,使产物的形成提前到来。误懒穗依杏飞蠕功哗庞找恭仪泛败洛柔滚醋艇绑颐脆作缠狡讳锥闪禄琴及种子扩大培养种子扩大培养这是由于种子量多,同时种子液中含有大量体外水解酶类,有利于对基质的利用,并且生产菌迅速被占据了整个培养环境,则可减少杂菌生长的机会。但是,如果接种量过多,往往使菌丝生长过快、培养液粘度增加,造成溶解氧不足,而影响产物的合成。近年来,生产上多以加大种子量及采用丰富培养基作为获得高产的措施。有的产品采用二只种子罐接一只发酵罐称双种法。也有的采用倒种法,即以适宜的发酵液倒出适量给另一发酵罐作种子。乘轩每这舅抹沈执蓝法鸡留塔洪词萌沏贿靴苗踪憋拂情亢衣蓝尧傍剐帛趋种子扩大培