文档介绍：伴高血压2型糖尿病大鼠模型的建立
(作者:___________单位: ___________邮编: ___________)
作者:孙兆峰王利张玲李大伟夏作理
【摘要】目的制备与人类发病过程类似的伴高血压2型糖尿病大鼠模型。方法选择40只SPF级雄性Wistar大鼠随机分为对照组12只和实验组28只,对照组以标准大鼠饲料饲喂,实验组以高脂高盐饲料喂养,两组均饮用大鼠专用去离子水,16 w进行正糖钳实验,确定胰岛素抵抗,腹腔注射链脲佐菌素(STZ)造成2型糖尿病。实验过程中每周测食量、水量和体重,每4 w测血糖和尾动脉血压,实验16 w时取血测空腹血浆胰岛素。结果饲喂高脂高盐饲料16 w后,与对照组相比,实验组尾动脉血压明显升高,差异显著(P<);实验组空腹胰岛素浓度明显高于对照组(P<);与对照组相比,实验组葡萄糖输注速率明显降低,两组差异有统计学意义;STZ注射后实验组血糖明显升高,达到了糖尿病的诊断标准。结论高脂高盐饮食配合STZ腹腔注射可成功诱导出伴高血压2型糖尿病大鼠模型。
【关键词】 2型糖尿病;高血压;高脂肪高盐饮食;高胰岛素正常血糖钳夹实验
高血压是糖尿病患者极为常见的共患病,总体上糖尿病伴高血压的患病率约在20%~50%左右。以往研究多集中于单纯2型糖尿病或单纯高血压,对2型糖尿病合并高血压的实验研究相对较少,而后者的实验结论往往对临床则有更高的指导意义。长期食用以脂肪为代表的高热量饮食可导致胰岛素抵抗(IR),而高盐饮食则和高血压的发生有关,新近已有学者〔1,2〕采用不同配比的高脂高盐饲料喂养建立代谢综合征(MS)大鼠模型。本研究旨在以高脂肪高盐饮食诱导配合链脲佐菌素(STZ)腹腔注射建立一种伴高血压的2型糖尿病大鼠模型。
1 材料与方法
实验动物选用SPF级雄性Wistar大鼠 40只,体质量(140
±20) g,购于山东中医药大学实验动物中心,合格证号:SCXK(鲁)20050015。动物饲养于半透明IVC盒内,自由饮食进水,明暗周期12 h,单笼饲养。动物房温度 22~26℃,湿度55%~65%。适应性饲养7 d后,用随机数字法将大鼠分为对照组12只和实验组28只。实验组于注射STZ后第3天和第5天各死亡1只。
实验材料和主要仪器 STZ和戊巴比妥钠购于Sigma公司,肝素和中性胰岛素购于江苏万邦生化医药公司,罗康全血糖仪及试纸购于美国罗氏公司,胰岛素放免试剂盒购自中国原子能科学研究院同位素研究所。微量注射泵购于浙江大学医学仪器公司,ALCNIBP无创血压测定分析系统由上海澳尔科特生物技术公司生产。
方法
造模饲料实验大鼠标准饲料购于山东中医药大学实验动物中心。造模饲料由质量比占75%标准饲料加食用化猪油20%和氯化钠5%加工而成。
模型制备实验大鼠适应性饲养7 d后,对照组继续以标准大鼠饲料喂养,实验组则以高脂饲料取代标准大鼠饲料喂养,两组均饮用大鼠专用纯净水,喂养16 w后,两组各取6只大鼠进行正糖钳实验,确定发生IR后,实验组给予STZ 20 mg/kg腹腔注射,对照组予相同体积枸橼酸缓冲液(pH=)。
正常血糖钳夹实验采用罗谋伦〔3〕等的方法稍加改良,禁食不禁水大鼠12 h 后,称重,以