文档介绍：中国海洋大学
博士学位论文
仿刺参(Apostichopus japonicus)水溶性海参皂苷的分离纯
化及其药理活性研究
姓名:袁文鹏
申请学位级别:博士
专业:海洋生物学
指导教师:樊廷俊
20070601
签字日期:功.#禄θ独创声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含未获得ⅲ怀崦恢鄙跛嬉9冶直明的:奎拦互空蚱渌逃沟难换蛑な槭褂霉牟牧稀S胛乙煌ぷ的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名:
签字冢毫︵瑁辉拢学位论文作者签名:哎名裕签字日期:厶再钿猡日学位论文版权使用授权书阜本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定,有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅。本人授权学校可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。C艿难宦畚脑诮饷芎笫视帽臼谌ㄊ导师签字学位论文作者毕业后去向:工作单位:通讯地址:电话:邮编:’
仿剌参苄院2卧碥盏姆掷纯化及其药理活性研究摘要皂苷蛟磉广泛存在于部分陆生植物和海洋棘皮动物海参和海星中,具有溶血、抗肿瘤、抗真菌、细胞毒、免疫调节、抑制瓵酶等多种生理和药理学活性。海参体内富含的海参皂苷,是一类主要的次生代谢产物。目前,对海参皂苷的分离制各主要采用乙醇或甲醇等有机溶剂萃取法,但这类方法不仅有机溶剂使用量大、成本高、易污染环境、不适于工业化生产,而且所得海参皂苷制品的水溶性较差,限制了海参皂苷在医学俅采系挠τ猛径和应用范围。遗憾的是,至今还未见到有关水溶性海参皂苷分离纯化及生物活性的研究报道。为此,本文以仿刺参2料建立了其水溶性海参皂苷的提取方法,利用各种层析技术对水溶性海参皂苷进行了分离纯化,并对各种皂苷制品的抗菌活性进行了研究,利用体外培养的肿瘤细胞进行了抗肿瘤活性研究,并进行了抗氧化和驱蝇活性研究,旨在筛选出具有强抗真菌和抗肿瘤活性的水溶性海参皂苷纯化样品。为利用水溶性海参皂苷研制高效抗真菌、抗肿瘤及驱蝇药物创造条件。利用正交实验对从冻干仿刺参加工废弃液中制备水溶性海参皂苷的技术工艺进行了优化,结果显示,从冻干仿刺参废弃液中分离制备水溶性海参皂苷的最佳技术工艺条件为:仿刺参废弃液值为,.罂树脂桂的上样速率为吨寤痟、洗脱用乙醇浓度为%、洗工业化生产等诸多特点,不仅可用于水溶性海参皂苷的大规模制备和生产,而且还充分利用了冻干仿刺参加工废弃液,有效避免了因该废弃液从冻干仿刺参废弃液中分离制备出的水溶性海参皂苷属于三萜皂脱体积为。该技术工艺具有操作简单、有机溶剂使用量少、适合于排放所造成的环境污染问题。苷;抑菌结果表明,水溶性海参皂苷对裂殖酵母
和.%;剂量为和//逯氐腟轿组分能显著提高、、和/,而对枯草芽胞皇曼堡鲎盔兰量主翌圣兰兰垄笙兰緄咨钪榫⑵咸烟烤也【、黄瓜桔萎病原均具有显著的抑菌活性,其最低抑菌浓度捣直鹞狾..金黄色葡萄球菌⒋蟪Ω司和绿脓杆菌挥幸种谱饔茫凰迷碥斩蕴外培养的富颈癌细胞、伟┫赴一胃癌细胞和肝癌细胞均具有显著的增殖抑制活性,值分别为.、.、.;所得皂苷没有明显的抗氧化活性。%、%、%和%进行洗脱,发现%、%和%乙醇溶液洗脱组分不仅对终婢哂邢灾目拐婢钚裕叶蕴逋馀嘌种癌细胞也均具有显著的抗肿瘤活性。所得具有显著抗真菌活性和抗肿瘤活性的%乙醇溶液洗脱组分,,获得了炙性海参皂苷单体组分,%、啤酒酵母菌、白色念珠菌、葡萄炭疽病原菌、黄瓜枯萎病原菌和黑曲霉的迪嗤直鹞.、、┫赴腎值分别为.、.,剂量为和/逯氐腟单体组分,能显著抑制小鼠实体瘤的生长,其对实体瘤的抑制率分别为.%、.%、/。’
。生凋亡的能力,浓度为肛痬痹内可诱导几乎所有细胞发生凋亡,且浓度为和显的掀K得魉苄院2卧碥盏ヌ遄榉諷之所以具有抗癌本文在国内外首次建立了制备水溶性海参皂苷的最佳技术工艺及其单体组分的纯化方法,分离纯化出具有极强抗真菌和抗肿瘤活性的水溶性海参皂菅单体组分,不仅可以作为纯天然新型海洋抗肿瘤药物和抗真菌药物研制的理想候选者,而且对其它海洋棘皮动物水溶性皂苷的分离纯化具有重要的指导价值