文档介绍：--------------------------校验:_____________-----------------------日期:_____________微生物实验报告微生物学大实验班级:姓名:学号:(1)了解配制微生物培养基的原理和培养基的种类。(2)掌握配制微生物通用培养基的一般方法和操作步骤。实验原理培养异养细菌最常用的培养基是牛肉膏蛋白胨培养基,它是一种天然培养基。牛肉膏是牛肉浸液的浓缩物,含有丰富的营养物质,它不仅能为微生物提供碳源、氮源,还含有多种维生素。蛋白胨是酪蛋白、大豆蛋白或鱼粉等经蛋白酶水解后的中间产物,含有䏡、胨和氨基酸等丰富的含氮素营养物,因此完全能满足大多数异养细菌对营养的需要。材料和器皿(1)试剂:牛肉膏、蛋白胨,NaCl,1mol/LNaOH,1mol/LHCl。(2)器皿:台秤,玻璃烧杯,搪瓷烧杯,三角瓶,量筒,漏斗,试管,玻璃棒等。(3)其他:pH试纸,牛角匙,牛皮纸,棉花,纱绳,灭菌锅等。(2)称取药品:按照营养基配方与配量分别称取各药品,取少于总量的水于烧杯中,将培养基成分(琼脂除外)逐一加入水中待溶。(3)加热溶解:将烧杯放在石棉网上,用文火加热,并不断用玻璃棒搅拌,使各药品快速溶解,然后补水至500ml。—(5)分装:将配制好的培养基分装到相应的玻璃器皿中,并在固体和半固体培养基中加入琼脂,贴好标签,待灭菌。实验目的懂得加压蒸汽灭菌原理及其安全使用的注意事项。实验原理以加热密封锅体内的水和水蒸气的压力来提高锅体内蒸汽温度而达到对物品灭菌的目的。方法和步骤(1)加水:取出装料桶,往锅内加水至与搁架圈同样高度为止。(2)装料:将待灭菌的物品放入装料桶内并放回锅。(3)加盖(4)排气:在水煮沸后,以蒸汽驱赶锅内的空气沿排气软管从排气阀中溢出,待空气排尽后,才可关闭气阀继续加热。(5)升压、保压、降压(6)取料注意事项(1)注意检查锅体和锅盖上的部件是否完好,并严格按照操作程序进行,避免发生各类意外事故。(2)灭菌时切勿擅自离开岗位,要注意压力表指针动态;要按培养基中的营养成分的耐热程度来设置合理的灭菌温度与时间,以免营养成分过多被破坏。(3)务必待锅压下降到零后再打开排气阀和锅盖,否则因锅内压力突然下降,使瓶装培养基或其他液体因压力瞬时下降而发生复沸腾,从而造成瓶内液体沾湿棉塞或溢出等事故。(4)在放入灭菌料桶前,切记应往锅体内加入适量的水,若锅体内无水或水量不够等均会造成在灭菌时引发重大事故。(穿刺接种法和液体接种法)实验材料目的掌握穿刺接种法并观察细菌在半固体培养基中的运动力。实验原理穿刺接种法就是用接种针挑取少量菌苔,直接刺入半固体直力柱培养基中央的一种接种法。方法和步骤1、接种前准备(1)标明菌名(2)旋松棉塞(3)点燃酒精灯2、穿刺接种法(直握法)(1)挑取菌种:在超净台中,酒精灯旁,左手持菌种管,右手拿接种针,经火焰灭菌后,用持针的右手拔出试管塞,试管口过火灭菌后再将接种针伸入菌种管中,现在斜面上端冷却后挑取少量菌苔,移出接种针,管口再过火,塞上塞子,将菌种管放回试管架上。(3)灭接种针上的残菌:将带有菌的接种针在火焰上烧红,经灭菌后才可以放在桌面上。随手再将塞子塞紧,以防脱落。3、培养将已接种的直立柱试管置37℃恒温箱中,培养24h后取出,通过透射光目测细菌在穿刺线上的生长情况,并记录结果。4、接种后处理(1)清洗:将废弃的菌种管塞子拔去,置水浴中煮沸20min,然后刷洗干净,倒置于试管架上,沥干。(2)整理:清理桌面。实验结果结果总体上来说算不错,穿刺线形状如玻璃棒,有扩散现象;边缘不整齐,这说明了大肠杆菌有鞭毛,可运动。注意事项(1)半固体培养基琼脂的用量依据琼脂牌号不同而定的。其硬度的判断,以培养基冷却凝固后,用手轻敲即碎为准。为使培养基透明而不浑浊,配置的培养基必须过滤。(2)接种前应该将接种针拉直,穿刺时手要平稳,不可左右摆动。(3)穿刺接种时,接种针不可穿透培养基。实验目的掌握利用各种接种工具进行液体接种的步骤及方法。观察细菌在液体培养时的群体特征。实验原理在无菌操作条件下,用无菌的接种环、滴管、移液管或移液枪等接种工具将斜面菌种或菌种悬液移接到液体培养基中的一种方法。在定量接种时可用移液管进行。方法与步骤接种环接种1、接种前准备(1)标明菌名(2)旋松棉塞(3)点燃酒精灯2、接种操作要点左手持试管,右手拿接种环,在火焰上灭菌后,将接种环伸入菌种管中,现在斜面上端冷却后挑取少量菌苔转移到试管的新鲜培养液中,让接种环在液面和管壁的交界处反复摩擦及振荡,以洗下环上的菌体,使其均匀分散入培养液中,然后移出接种环,塞上塞子,并立即烧去环上的菌体。3、混匀培养液:用拇指和中指捏