文档介绍：密缎;一抗蛋白酶降解多肽的设计、合成及代谢和生物活性研究届硕士硒究生学位论文掌器ㄒ担荷锊锱视敕肿由镅掰糠筋茫荷镉泻了垦尝师:周英教授划克良研究员研究生:付慧蒋贵州大学中国·责潮·舞阳簟分类号:垂垂§荒论文编号:蝗
摘要基于蛋白水解酶的催化机制和蛋白酶抑制剂的结构特点,我们曾提出了一个新的长效肽设计思路:即如果将一些易形成氢键的化学功能基团,如氨基,脲基、乙酰胺基等具有质子性给体、受体或两者兼有的基团等,引入到肽链的合适位点,在蛋白酶水解肽键的过程中,这些功能基可能通过竞争性地与蛋白酶的活性中心结合,占据原有肽键的位置,破坏或减缓肽键与蛋白酶水解过渡态的形成,,分别在其撕位、端和唤辛税被岬男奘位蛱婊唬⒔辛颂迥谏锘钚院吞逋獯黄兰邸=峁发现氨基、脲基、乙酰胺基等基团修饰的多肽体内作用时间明显延长,体外半衰期也明显增加。这样的实验结果初步支持了所提出的新的长效肽设计思路。为了进一步探讨长效肽设计思想的可行性和普适性,本论文开展了以下两方面的工作:鲜隹赡芫哂锌姑附到饽芰Φ墓δ芑氲酵桓鯨卓辜恋腘端、缓位,,经大鼠体内抑制睾酮作用的生物活性评价,所有类似物均显示出拮抗活性,但均没有换位单独修饰端相同碧迥谧饔檬奔涑ぃA私徊窖芯扛蒙柘氲钠帐市约肮δ芑奘味嚯挠氲鞍酌傅南嗷プ饔没疲针对糜蛋白酶和胰蛋白酶的水解位点,设计合成了个新的模型六肽。糜蛋白酶和胰蛋白酶体系中的代谢结果发现:脂肪族氨基酸的侧链上引入羧基和酰胺基等基团,可以明显延长模型六肽在糜蛋白酶中的半衰期;芳香性氨基酸的侧链上引入氨基、乙酰胺基和脲基等基团,可以明显延长模型六肽在胰蛋白酶中的半衰期。对碎片的分析发现多肽的酶解位点与蛋白酶的选择性水解位点一致。结合糜蛋白酶和胰蛋白酶水解多肽的特点,该结果可能说明:如果想抑制糜蛋白酶等选择性水解芳香性氨基酸的蛋白酶,可以将羧基和酰胺基等基团引入脂肪族氨基酸的侧链上;如果想要抑制胰蛋白酶等选择性水解脂肪族氨基酸的蛋白酶,可以将氨基、乙酰胺基和脲基等基团引入芳香族氨基酸的侧链上。这些实验结果与前期的研究结果也是一致的,进一步支持了所提出的长效肽设计思路。关键词:功能基;长效肽;抗酶降解能力贵州大学硕十学位论文抗蛋向酶降解多肽的设计、合成及代谢和生物活性研究
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刿大学硕士学位论文论文中主要缩写词说明抗蛋白酶降解多肽的设计、合成及代谢和生物活性研究
第一章前言抗蛋白酶降解多肽的研究概况功能各异的内源性生物活性肽是调控生物体内各种复杂生理活动的重要物质,它们对维持正常的生命活动具有重要意义,同时也与生物体内多种病理状态有关,因而对于许多病理过程都具有潜在的治疗前景。随着生命科学以及相关技术的发展,生物活性肽类化合物开发为药物的基础和条件越来越成熟。生物活性肽类药物以其具有高效、低毒的优点倍受药物化学家的青睐,但其发展却因为肽本身的理化和生化性质受到限制,如难以通过细胞膜,在体内酶作用下快速降解等因素导致了肽类药物的生物利用度低,体内半衰期短等,这些因素都成为肽类药物临床应用上的障碍【.因此寻找体内半衰期长,,但往往还未到达靶点已被蛋白酶降解,不能产生药效。蛋白酶对多肽的降解可以发生在吸收、分布及排泄等各个阶段,直接影响了药物的半衰期、生物利用度、血浆清除率等参数,这些都跟药物的作用周期密切相关。因此多肽药物的蛋白酶降解稳定性是决定药物是否长效的重要因素。目前用以提高肽类药物蛋白酶降解稳定性的主要策略有:与酶抑制剂的联合运用【;肽类药物剂型的改变换Ы峁剐奘我种泼附獾取F渲校üЫ峁剐奘我制酶解一直是药物合成领域研究的重点。抗蛋白酶降解的多肽化学结构修饰方法,依据修饰基团和修饰位点的不同,可分为以下几种:聚合物缀合:多肽与聚合物缀合形成的三维结构遮住了肽的表面,减少了蛋白酶对酰胺键的进攻,从而可以提高多肽药物的稳定性缇垡叶嘲。聚苯乙烯马来酸【修饰等。但是聚合物缀合往往导致多肽活性降低。前药策略:前药策略就是将一个能够加强药物输送的分子连接到药理活性基团上,在作用位点或接近作用位点时,连接分子可以在生理条件下或在蛋白酶作用下自动切割下来,恢复原药的活性。前药的设计同样可以提高肽类药物的蛋白酶降解稳定性。酯化已经在针对脑部运输设计的前药中显示出特殊的应用价值:含有氨基、羟基或羧基的药物的酯化极大提高了脂溶性,加强了穿透血