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UV与DES复合诱变选育高产脂肪酶菌株.pdf

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UV与DES复合诱变选育高产脂肪酶菌株.pdf

上传人:小泥巴 2014/3/9 文件大小:0 KB

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文档介绍

文档介绍:万方数据
与春嫌毡溲∮卟久妇李忠英ぱ罹,罗跃中保亟ū,,湖南株洲;吓┮荡笱蒲г海铣ど一,值自然。璃珠振荡分散,以无菌滤纸或脱脂棉过滤,使形成单君脂肪酶珽.·是类脂化合物分解、合成和酯交换的催化剂,广泛应用于食品、轻纺、皮革、化妆品、洗涤剂、有机合成、医药等领域¨。近年来,国内外对生物法处理含油废水的研究逐渐形成热点,重视各类油脂废水废渣的生物降解研究,可以有效解决其所带的环境污染问题。如何提高脂肪酶活力,是个技术的难题,而目前由于野生型菌种的脂肪酶活力相对较低,因此,利用各种诱变手段选育高产脂肪酶生产菌一直是国内外研究的重点。本研究通过紫外线和硫酸二乙酯猿跎妇一春嫌毡洌蕴岣卟久妇产酶性能,为各类含油脂废水废渣高效降解提供具有应用价值的菌株。牧虾头椒菌株前期筛选得到的油脂降解优势菌珊匣ぶ耙导际跹г汗疑镏埔┗乇藏。主要仪器和设备贤夥止夤舛燃疲毡镜航颍型离心机,江苏;电子天平,梅特勒;超净工作台,江苏净化;立式压力蒸汽灭菌锅,上海申安;生化培养箱,;恒温水浴箱虾H仰净化;~,,~,葡萄糖~,琼脂.⒔团嘌浩咸烟~,橄榄油·.∫褐票赣蒙硌嗡票妇海尤氩细胞,分散程度达%以上。要求在诱变前对菌液进行稀释。.久富畈舛ú捎盟峒畹味ǚ℉.贤庀哂毡洹薄扇∥蘧僮鳎』罨蟮挠脂降解优势菌环于盛有无菌水的三角瓶中,加入无菌玻璃珠并置摇床上振荡混合均匀,然后配成每毫升个的菌悬液。各取处理好的菌悬液放入个无菌培养皿中,依次放置于距贤獾处的磁力搅拌器上,然后依次打开培养皿盖并开启磁力搅拌器,分别照射做槠叫醒。在暗光环境下,分别取经紫外线诱变的菌悬液涂布于个固体平板培养基上,包扎后倒置于℃恒温培养箱中避光培养扑阒滤缆省2⑻羧【浣虾袂掖蟮鼍辏编号后接种于试管斜面保藏,同时取对应的菌株接种到摇瓶耙毫课校糜妫灰〈才嘌舛ǚ⒔鸵旱闹久活力。.蛩岫阴诱变处理б宰贤庀哂毡所得的酶活力最高的菌株作为出发菌株,进行硫酸二乙酯诱变。取孢子悬液份,与浓度为以的比例混合,在℃摘要:以产脂肪酶菌株痷礐为出发菌株,进行了与硫酸复合诱变处理。筛选出一株高酶活的目的菌株,命名为痷一F涿富钗C亢辽,ù笛橹っ鳎湟糯阅芪榷ā关键词贤庀撸涣蛩岫阴ィ桓春嫌毡洌恢久文献标识码:文章编号:—培养基对照用サ腄溶液氨基酸和生物资源中图分类号:~,收璃日期:一一作者简介:李忠英,女讲师,主要从事化学化工教学科研工作。·~,。:琁/
万方数据
从固体鉴别培养基上挑取疌≥的菌株,紫外线是常用的物理诱变因子,是诱发微生物突变的一种非常有用的工具。诱变主要是通过振荡处理,分别振荡处理后加入%硫代硫酸钠中止反应。将诱变处理的菌液稀释到一,以未经化学诱变处理的出发菌为对照,℃恒温培养箱中培养=嘌好的平板取出,菌落计数,计算致死率。挑取菌落较大且厚的菌株,编号并接人试管斜面保藏,同时取对应的菌株接种到摇瓶耙毫课校。〈才嘌舛ǚ⒔鸵中脂肪酶活。〕龅牟缸罡的菌株连续ù嘌蟛舛ㄆ涿富钪担⒈冉前后酶活力变化。峁敕治复合诱变致死曲线绘制及诱变条件的选择实验研究发现,对降解优势菌分别用紫外线和恚玫街滤狼呓峁⒑屯。通常用诱变剂处理菌株后,只有当致死率达到%左右时得到