文档介绍：万方数据
紫外一激光复合诱变选育天冬氨酸转氨酶高产菌株薛正莲,江荣珍,杨超英,王洲,苏燕南不展こ檀笱镉牖Чこ萄г海⑸锓⒔桶不帐」こ碳际跹芯恐行模不瘴吆菌种选育在发酵工业生产中具有十分重要的地位和作用,虽然自然选育可以保持菌种的稳定性,达到纯化菌种的目的,但自然变异的几率很低,产量提高的范围往往在生物学波动的范围内,因此要大幅度提高菌种的生产能力,最有效的途径是诱变育种虽然通过基因克隆技术构建氨基酸产生菌,可以大幅度提高菌株产酸水平,但目前,工业生产使用的绝大多数产生菌主要是通过诱变方法结合原生质体融合方法选育获得的。通过传统诱变育种选育不仅可得到遗传性稳定的高产菌株,而且操作条件和技术要求不高,实验操作也较为容易,因而使其在工业微生物育种中占有绝对优势的地位一原生质体诱变是一种在细胞原生质体化后进行诱变的育种技术,细胞被脱去细胞壁之后,使诱变剂更加容易诱发细胞的遗传基因发生突变,从而以更高的突变率产生各种突变菌株,通过一定的筛选方法即可选育出需要的菌株,此法已得到广泛的应用,并取得丰硕的成果”。本文以大肠杆菌Ⅺ一3龇⒕辏捎米贤和—激光以及复合诱变原生质体,以筛选高产天冬氨酸转氨酶菌株。。斜面培养基:,无水硫酸镁溶液,磷酸二氢钾溶液,富马酸,:蛋白胨,氯化钠匏蛩崦姿岫饧,,蒸馏水定容,氨水调为一,鹁发酵培养基:富马酸,玉米浆,氯化钠溶液,无水硫酸镁溶液,磷酸二氢钾溶液,蒸馏水定容,:在斜面培养基的基础上加入指示剂,鹁再生培养基:大肠杆菌用榷ㄒ号置,鹁撼逡海赫崽,,╗菌体浓度的测定方法淳迳锪:通过发酵液在处吸光值体现。.富盍Χㄒ每小时每毫升酶液所转化底物富马酸的毫克数。.於彼嶙0泵富盍Φ牟舛吸取酶液,加入底物,。·环从舛ǚ从η昂蟾宦硭崤ǘ鹊谋浠即可算出底物富马酸的克数一计算酶活方法:摘要:对天冬氨酸转氨酶产生菌大肠杆菌一侍褰凶贤庖患す飧春嫌毡渖秆。峁砻鳎春嫌毡涠愿镁原生质体有明显的致死作用。以致死率和正突变率为指标,确定了紫外和—激光照射的最佳时间分别为。在此条件下对大肠杆菌原生质体进行紫外一激光复合诱变,得到旮卟辏直鹈猉—、一一富罱铣龇⒕陎分别提高了.%、.%和.%。传代培养表明突变株生产性能稳定。关键词:紫外线;—激光;天冬氨酸转氨酶;原生质体;复合诱变中图分类号:文献标识码:文章编号:———氨基酸和生物资源,鰅收稿冢作者简介:薛正莲,女教授,从事工业微生物育种及发酵方面的研究。..—
万方数据
错‰R桓宦硭岢跏寂ǘ龋珻,一反应终止时富马酸的浓度,芤环从σ旱淖芴寤琕酶一发酵液体积,,紫外光谱不仅能识别分子中不饱和基团的性质而且可以测定不饱和化合物含量,由于富马酸分子中有不饱和键,在紫外区有强吸收【。通过紫外波长的扫描,工作曲线在—·环段谙咝怨叵盗己茫⑾指宦硭嵩处有最大吸收值,其吸收值越大,则说明富马酸含量越高,也说明惶於彼岷吭叫 R谰菡庖辉理,可以用标准富马酸样品配制成若干梯度的溶液,分别通过实验,测定下担ü啻问验,绘制得到富马酸标准曲线,见图原生质体的制