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cath-K,人组织蛋白酶K酶联免疫分析试剂盒使用说明书.doc

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cath-K,人组织蛋白酶K酶联免疫分析试剂盒使用说明书.doc

上传人:文库旗舰店 2019/12/29 文件大小:22 KB

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cath-K,人组织蛋白酶K酶联免疫分析试剂盒使用说明书.doc

文档介绍

文档介绍:cath-K,人组织蛋白酶K酶联免疫分析试剂盒使用说明书cath-K,人组织蛋白酶K酶联免疫分析试剂盒使用说明书使用目的:本试剂盒用于测定人血清、龈沟液及相关液体样本中组织蛋白酶K(cath-K)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人织蛋白酶K(cath-K)水平。用纯化的人组织蛋白酶K(cath-K)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入组织蛋白酶K(cath-K),再与HRP标记的组织蛋白酶K(cath-K)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的组织蛋白酶K(cath-K)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人组织蛋白酶K(cath-K)浓度。试剂盒组成1  30倍浓缩洗涤液  20ml×1瓶  7  终止液  6ml×1瓶2  酶标试剂  6ml×1瓶  8  标准品(240pg/ml)  ×1瓶3  酶标包被板  12孔×8条  9  标准品稀释液  ×1瓶4  样品稀释液  6ml×1瓶  10  说明书  1份5  显色剂A液  6ml×1瓶  11  封板膜  2张 6  显色剂B液  6ml×1/瓶  12  密封袋  1个cath-K,人组织蛋白酶K酶联免疫分析试剂盒使用说明书cath-K,人组织蛋白酶K酶联免疫分析试剂盒使用说明书试剂盒操作步骤:温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。试剂盒样品的采集和存储血清-使用血清分离管,使样品在室温下或凝块一夜之间两个小时在大约1000×-20°C或稀释后使用80oC。避免反复冻融循环。血浆采集血浆用EDTA或肝素作为抗凝剂。15分钟,离心样品×G在2到8摄氏度范围内采集30分钟。去除血浆和即刻检测或者储存样品液体类标本:包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。)血清:室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。)血浆:应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。)尿液:用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。)细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(-)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。)组织标本:切割标本后,称取重量