文档介绍：斡肼然佑盏既伺呱鱿赴蛲龅难芯课题来源:国家自然科学基金资助专名称劳动卫生与环境卫生学学位申请人余少珍指导教师邹飞教授答辩委员会主席蒋义国教授答辩委员会成员余日安教授丁振华教授刘云岗教授孟晓静教授论文评阅人林忠宁教授刘移民教授月日广州业南方医科大学级硕士学位论文猧
冲参与氯化镉诱导人胚肾细胞凋亡的研究有研究者通过体内和体外实验表明当镉浓度高于甇Ⅲ时,镉可诱导许多硕士研究生:余少珍指导老师:邹飞教授摘要研究背景人体,并且在体内缓慢积累。,受污染环境中的镉含量也逐年上升。环境中的重金属镉的含量越来越高,其毒探索镉中毒的预防和治疗药物就显得尤为重要。镉影响多种细胞活动,比如凋亡,增殖,分化等。细胞凋亡是细胞死亡的基本形式,在多细胞有机体的动态平衡中起着至关重要的作用。钙离子信号通护细胞正常功能也是非常重要的。因此,研究证明不同细胞内钙浓度变化可诱导细胞凋亡,并且越来越多的证据支持在细胞凋亡进程的早期和晚期阶段:增加细胞内钙离子浓度可以导致细胞凋亡。镉且恢钟猩亟鹗簦胙酢⒙取⒘虻然гK匦纬晌藁物分布于自然界中。镉可以蓄积在植物和动物的体内,并可以通过食物链进入性危害之大已经引起人们的普遍重视。镉已被美国国家毒理学计划列为人类致癌物。在现代化工业和科技的飞速发展,镉污染问题已经恶化,并且很显然镉对人体有潜在危害。但到目前为止,慢性镉中毒尚无有效的治疗方法。因此,路在许多细胞活动,包括神经分泌,骨骼肌肉收缩,细胞生长和分化中起着重要的作用。另一方面,细胞在外源性和/或内源性因素刺激下,细胞内钙稳态维组织和器官诱导细胞凋亡,比如肾,肺,睾丸和肝脏。虽然镉诱导的不同细胞硕士学位论文
类型的细胞毒性和细胞凋亡的研究较多,但确切研究机制尚不清楚。有研究表明镉可在不同层次干扰细胞内钙稳态,也有研究显示镉诱导不同类型细胞的细胞凋亡,是通过增加细胞内钙离子浓度诱导细胞凋亡。现在有越来越多的证据表明,瞬时受体电位通道参与钙离子内流的途径,它被认为是一个重要的细胞内钙离子稳态调节的离子通道;刹斡敕浅V匾5南赴蹋如细胞增殖和凋亡。然而,斡腼佑盏既伺呱鱿赴蛲鋈匀徊幻魅贰2且镉诱导细胞凋亡的详细机制仍然知之甚少,因此,我们在此研究首次揭示本研究通过构建氯化镉盏既伺呱鱿赴蛲龅哪P停在此模型基础上探讨斡肼然佑盏既伺呱鱿赴鸋蛲龉碳捌机制以期为镉中毒的研究和预防控制提供新思路。方法和ü魇较赴羌觳獠煌ǘ鹊腃作用细胞后细胞凋亡的情况,以建立盏既伺呱鱿赴鸋赴蛲龅哪P汀和ü齊觳馊伺呱鱿赴鸋腡ǖ姥切偷谋泶锴榭觥和ü侍遄H綯柿#直鹩肦蚖检测翰捎玫绺旭詈系壤胱犹逯势甅检测加入不同浓度笕伺呱细胞细胞内镉离子的含量。胞内钙离子动态变化。陲佑盏既伺呱鱿赴蛲鲋蟹⒒拥墓丶饔谩目的和蛋白水平的变化,采用流式细胞仪观察细胞凋亡情况,观察上调的表达对盏既伺呱鱿赴鸋赴蛲龅挠跋臁和ü魇较赴羌觳釩对人胚肾细胞细胞周期的影响。和ü泶锷系鱐的表达,⒕担鄄煺H伺呱鱿赴鸋尤隒时细摘要
照组相比明显升高并且具有统计学意义S紺饔萌伺处理人胚肾细胞后细胞核形态变化。结果显示州饔萌伺呱采用检测州饔肏赴骉、和豫切汀褂眉す夤簿劢瓜晕⒕担鄄旒尤肼然雍笕胚肾细胞胞内钙离子实时动态变化。结果瓹可诱导人胚肾细胞凋亡不同浓度砣伺呱鱿赴鸋∈焙螅昧魇较赴羌觳庀赴凋亡率。结果显示,浓度在以上的小时后细胞凋亡率与对∈焙螅琀赴顺鱿置飨缘暮伺ㄋ酢⑷旧势蔚认赴凋亡的特征性表现,并形成典型的凋亡小体。以上结果表明,捎盏既伺5腍赴泶锪鯰ǖ姥切正常条件下,人胚肾细胞细胞的锞碇悄旱缬痉治觯检测到六个单一条带,大小为瓹处理细胞对钚杂跋有影响。结果显示:饔肏赴笠种屏薚、饔肏赴煌奔銽表达量的变化,验证的增加而下降,提示赡茉贑诱导细胞凋亡过程发挥了作和ü泶锷系鱐肾细胞不同时间后,采用蛋白印迹法检测相关蛋白切割片段,结果显示,∈焙笄懈頟飨陨摺S胔旧ǚ椒ḿ觳釩细胞肾细胞凋亡,并具有剂量和时间反应关系。朐て诘牟锎笮∫恢,分别对应于、、表达量的变化,验证是否对、表达的表达,并且谋泶锪渴亲罡叩摹R虼宋颐怯妹庖哂〖7ḿ觳鞍妆泶锪康挠跋臁=峁允荆琓蛋白的表达量随饔檬奔硕士学位论文、、
系鱐表达对诱导人胚肾细胞凋亡率的影响为了证实欠癫斡隒诱导人胚肾细胞的凋亡,本研究采用过表绦饔罂上灾档腿伺呱鱿赴鸋赴蛲雎剩琓过表达后加与空质粒加橄赴蛲雎手洳钜炀哂型臣蒲б庖.;表明泶锒訡诱导人胚肾细胞凋亡过程中发挥了一定的作用,从而进一步证实斡隒诱导人胚肾细胞凋亡过程。瓹对人胚肾细胞细胞周期的影响以流式细胞术检测正常细胞加入韵赴芷诘挠跋臁=:加入驢赴鸆暮吭黾忧掖嬖谂度梯度,加药组与对照组之间的含量