文档介绍:第卷第期长春工业大学学报自然科学版.,.
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群链球菌制剂的制备工艺
郎维, 张峰, 白春喜, 邱芳萍
长春工业大学化学与生命科学学院,吉林长春
摘要:采用改良后的无血培养基,将筛选选育后得到的群链球菌进行制剂的制备研究,以
发酵后菌悬液的值为指标,通过正交试验分析对其进行条件优化。得到的制备工艺为:在
℃、摇床转速/下,装瓶量、值.、酵母粉用量. 、胰蛋白胨用量
.%、牛肉膏用量. 、葡萄糖用量. 。实验表明,菌体在改良后的培养基上生长良好,
形态特征符合群链球菌的形态特征。
关键词: 群链球菌;无血培养基;制备工艺
中图分类号: 文献标识码: 文章编号:—
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是韩、日等许多国家, 群链球菌制剂对恶性肿瘤
的治疗,表现出了稳定的性能和显著的疗效。
群链球菌制剂,又称一,是利用低毒但由于其具有溶血性,生产时常常依赖含血或
群酿脓性链球菌变异株株经灭活处理后冷血浆的培养基。传统的含血培养基成本很高,而
冻干燥获得的白色粉末。资料表明, 群链球菌且容易引入异源性物质,给患者带来痛苦。目前,
制剂具有直接的抗肿瘤作用,作为一种免疫赋活一些发达国家正在开展降低制剂副作用的研究工
剂有着余年的临床历史。在国外尤其作,但国内少见此方面研究的文献报道。
收稿日期:——
基金项目:吉林省科技计划发展基金资助项目—
作者简介:郎维一,男,汉族,,主要从事生物制药研究. 联系人:邱芳萍
一,女,,长春工业大学教授,理学博士,主要从事生物技术应用方向研究,—: .
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长春工业大学学报自然科学版第卷
在群链球菌制剂的制备过程中,常规培养量种子培养基,层纱布封口,在振荡器
基含一定量的血清%左右。近年来,无血培养上℃,/振荡培养。每次接种前
基的研制已成为细胞工程领域的重要课题,本研都要进行革兰氏染色镜检,如发现污染杂菌则废
究采用改进后的无血培养基来制备群链球弃。
菌制剂,以求降低潜在热源,降低其副作用。并采.. 摇瓶发酵
用正交试验分析,以值为考察指标,对制备三角瓶中装液量,层纱布
工艺中的各个因素进行优化比较。结果显示,利封口,接种量, ℃,/振荡培养
用优化后的制备工艺,具有生物量稳定且潜在异。
源较少等优势。.. 产品收集与保存
将青霉素和过氧化氢加入培养物内灭活,
材料与仪器
经过震摇、水浴。,、离心
. 菌株/,后,用生理盐水悬浮,二次
组型链球菌弱毒株,由本室自行分离。离心后,将沉淀冻干得到白色菌体于粉称重,密封
. 试剂
保存于无菌瓶中。
胰蛋白胨、酵母粉,英国公司;
. 群链球菌制剂菌悬液浓度和吸光度值关
青霉素,华北制药集团。系曲线.
. 培养基及培养条件发酵后菌悬液的吸光度值与菌体的生物量成
牛肉膏蛋白胨培养基,,摇床转速正比关系,配制成一系列不同浓度的菌体制剂生
/。理盐水悬液,在处测定吸光度值,以浓度
. 实验仪器和吸光度值为坐标绘制曲线,利用线性回归方程,