实验一DNA琼脂糖凝胶电泳.ppt

文档介绍：实验一DNA的琼脂糖凝胶电泳指导老师:苏乔副教授电话:84706356-606概述1、迁移方向2、影响迁移率的主要因素:(1)DNA的分子大小(2)琼脂糖的浓度(3)DNA的构象(4)电场强度3、未知DNA片段的大小计算线性双链DNA分子,其迁移距离与碱基对数目以10为底的对数值成反比已知分子大小的DNA标准物(DNAMarker)可根据电泳样品预计的片段大小选择使用。4、上样缓冲液(loadingbuffer)的使用(1)倍数(2)上样量少的时候可适当补充缓冲液或ddH2O5、常用的电泳缓冲液及其组成技术要点及注意事项1、使用1×TAE配胶,50mL/2块2、煮胶要充分,减少蒸发、避免糊底,稍凉即可加入Goldview(5-10μL/100mL)3、倒胶时要避免产生气泡4、待胶凝固完全后再拔出梳子5、电泳槽一定不能短路思考题总结本实验操作的关键环节经典失误集锦1、使用50×TAE配胶2、将DNAMarker误用做loadingbuffer再见!