文档介绍：重庆医科大学
硕士学位论文
Survivin反义寡核苷酸联合足叶乙甙诱导K562细胞凋亡的实验
研究
姓名:李建厂
申请学位级别:硕士
专业:儿科学
指导教师:徐酉华
20050501
地重庆医科大学研究生学位论文独创性声明丝堇:,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得重厌医科大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料,与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的颐鞑⒈硎拘灰猓申请学位论文与资料若有不实之处,:本人完全了解重庆医科大学有关保护知识产权的规定,即:,,,可以采用影印、缩印或其他手段保期日期:
符号说明醐英文全称反义寡核苷酸膜联蛋白半胱天冬蛋白酶二氨基联苯胺二甲基亚砜脱氧核糖核酸效应细胞蛋白酶受体一过氧化氢多药耐药惶堑鞍英文缩写Ⅱ也中文全称凋亡蛋白酶活化因子一杆状病毒馗唇峁慢性髓细胞自血病流式细胞术异硫氰酸荧光素羟乙基哌嗪乙磺酸凋亡抑制蛋白免疫组织化学自细胞介素一信使核糖核酸四甲基噻唑盐无义寡核苷酸光密度磷酸盐缓冲液多聚酶链反应阿霉素重庆医科大学硕士研究生学位论文:琹—猻猤
链亲和霉素一生物素一过脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法碘化丙锭蛋白激酶磷脂酰丝氨酸核糖核酸酶氧化物酶复合物法拓扑异构酶一足叶乙甙—重庆医科大学硕士研究生学位论文·—
一——墼垦燮兰堡主堡塞生塑坚溃琲匆骞押塑账崃:献阋兑疫岸阅帮巯赴蛲龅挠跋摘要目的:研究反义寡核苷酸对白血病细胞凋亡的影响,并探用ú舛ú煌ǘ鹊淖阋兑疫岸訩赴囊种坡剩岷闲翁苷酸后鞍妆泶锵碌鳎抟遄榧爸侍遄槲廾飨员浠、。方法:⒆H緎反义寡核萤酸对细胞Ⅳ蛋白表达的影响。实验分四组:反义组、无义组、脂质体组、空白组。反义及无义寡核苷酸两端均有黾罨虼奘危衾胱又侍褰榈嫉方式进行转染。转染小时后用免疫组化的方法检测蛋白表达。,反义寡核苷酸对细胞凋亡影响。实验分四组:反义组、无义组、脂质体组、空白组。转染小时后用免疫组化的方法检测活性,并在转染后不同时段用癆法测定各组细胞的凋亡率。⒆阋兑疫岸訩赴囊种谱饔谩学确定适用于联合琲匆骞押塑账岬淖阋兑疫暗呐ǘ取、反义寡核苷酸联合化疗药物足叶乙甙共同作用于细胞,实验分四组:联合组、反义组、足叶乙甙组、空白组。用结果:鬷蛋白在细胞中呈高表达,转染反义寡核转染Ⅳ反义寡核苷酸及小时,反义组活性较无狥ú舛ǜ髯橄赴牡蛲雎省义组、∈、小时,细胞阳性率分别为%、%左右,均较其他茹
⑾郑淖关键词:、反义寡核苷酸、细胞、足叶乙甙、凋亡、∈盞赴蛲雎矢哂转染后小时检测发现,反义组细胞凋亡率为%左右,也较其他各组明显升高.、用ú舛ㄗ阋兑疫岸訩赴囊制作用,结果发现,足叶乙甙对细胞的抑制作用呈浓度依赖性,浓度越大抑制作用越强;结合形态学确定,终浓度为痬鲜屎嫌研究联合应用反义寡核苷酸共同诱导细胞凋亡。⒃反义寡核苷酸与足叶乙甙的联合诱导实验中,用ḿ测发现,四组细胞凋亡率分别为:联合组.%、反义组.%、足细胞凋亡率分别为:联合组.%、反义组.%、足叶乙甙组.%,空白组ィ肫渌橄啾龋::达;蛴隟赴牡蛲鲇泄兀琒匆骞押塑账能使细胞活性升高,并可诱导细胞凋亡;⒆叶乙甙对细胞有抑制作用,其抑制作用呈浓度依赖性;小时,两者比较型臣蒲б庖濉S肁狥ㄔ叶乙甙组.%,空白组ィ肫渌橄啾龋:献镵匆骞押塑账峥上碌鱇赴鹲鞍椎谋反义寡核苷酸可促进足叶乙甙诱导的细胞凋亡。基因治疗重庆医科大学硕士研究生学位论文
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篠珹琄琣,重庆医科大学硕士研究生学位论文
前言童年发病率为/万。随着化疗、放疗、干细胞移植等综合治疗措施应用,白血病的治疗及预后有了极大的改观,完全缓解率及无病生存率均有很大提高。但发病原因也尚未完全清楚,所以研究白血病的发病机制,探索更有效的治疗方法是医疗和科研的一项重