文档介绍：山西医科大学
硕士学位论文
5-HT1A 受体对癫痫伴发抑郁的影响及神经保护的研究
姓名:陶琳
申请学位级别:硕士
专业:神经病学
指导教师:孙美珍
2011-05-25
山西医科大学硕士学位论文
5-HT1A 受体对癫痫伴发抑郁的影响及神经保护的研究
中文摘要
研究背景:
癫痫是神经系统常见疾病之一, 抑郁是癫痫病人常伴的心理障碍,文献统计
20-55%的癫痫病人合并抑郁[1],5 羟色胺与癫痫和抑郁发病均有关系, 5-HT 是神经系
统的重要神经递质, 参与人类的感觉、运动等许多生理过程, 其中 3 种,
5-HT1A,5-HT2C 与 5-HT7 被研究与癫痫有关[2], 5-HT1A 受体是目前被认为与抑郁最有
关的受体之一。Maris 等人[3]在海人酸大鼠模型中证实 5-HT1A 激动剂 8-OH-DPAT 可
以显著延长癫痫发作的潜伏期。对 5-HT1A 受体与惊厥控制的研究较多,但结果不一,
可能与选取的动物模型有关。氯化锂匹罗卡品癫痫大鼠模型是国际通用的、理想的颞
叶癫痫模型。病理改变为海马神经元脱失、胶质细胞增生[4]。但目前尚未见到文献报
道用 8-OH-DPAT 在氯化锂匹罗卡品模型中进行海马等边缘系统脑区的神经元凋亡、
胶质细胞增生的研究,本文旨在通过 5-HT1A 受体激动剂的干预是否可以影响神经元
凋亡、胶质细胞增生,从而进一步明确 5-HT1A 受体激动剂在癫痫发病机制中的作用,
为癫痫伴发抑郁的治疗提供实验依据。
目的:通过建立氯化锂-匹罗卡品癫痫伴发抑郁的模型试验,观察 5-HT1A 受体激
动剂 8-OH-DPAT 对大鼠的脑电图、自发性癫痫的发作次数、海马的神经元丢失及胶
质细胞增生的影响;通过强迫游泳,开放视野的行为学方法、荧光定量 PCR 方法测
定 5-HT1A 受体表达量来评定其抗抑郁的效果。
方法:1)建立癫痫伴发抑郁大鼠模型,雌性 SD 大鼠 122 只,给予氯化锂-匹罗卡
品,诱发大鼠癫痫持续状态,终止发作后存活且状态良好的大鼠出现自发性癫痫,经
过抑郁评定指标视为造模成功;2)将造模成功的大鼠随机分为 5 组:生理盐水组,
模型组,药物干预组为卡马西平组单用组,卡马西平分别添加低、高剂量 8-OH-DPAT
组。分别给予相应药物,通过大鼠的脑电活动、癫痫自发性发作次数、尼氏染色及胶
质纤维酸性蛋白免疫组化的方法观察抗癫痫的疗效;通过强迫游泳,开放视野的行为
学方法、荧光定量 PCR 方法测定 5-HT1A 受体表达量来评定抗抑郁的效果。
结果(1)造模过程中,除生理盐水组的 6 只大鼠之外,其余 116 只大鼠均诱发出
癫痫持续状态,存活且状态良好者 112 只,出现自发性癫痫者 95 只。行为学上表现
为:出现以口咽自动症为主的复杂部分发作,发展为强直阵挛发作,癫痫持续状态一
小时后给与安定中止发作;两天后进入静止期,两周左右发展为反复自发发作。经过
强迫游泳和敞箱试验评定抑郁,实验中模型对照组大鼠毛发失去光泽,反应迟钝,活
动减少,在规定时间内水平活动、垂直活动明显减少,中央格停留时间延长,情绪性
行为评分减低,不动时间延长,癫痫伴发抑郁大鼠造模成功率为 25%(2)脑电图及
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自发性发作:匹罗卡品组、卡马西平组出现阵发的多棘波,后者较前者波幅压低,
8-OH-DPAT 组散在出现单个棘波或尖波,且波幅明显降低。给药后一周内发作次数:
治疗组与模型组比较自发性癫痫发作次数减少,有统计学意义(P<),高剂量
组与其它两治疗组比较大鼠的发作频率明显减少(P<)。(3)尼氏染色的表达
结果:模型组海马区神经元存活较少,尼氏体减少,其它各组与之比较,治疗组神经
元损伤均有恢复,具有统计学意义(P<),治疗组神经元数从高到低依次是高
剂量组>低剂量组>卡马西平组,低剂量组与高剂量组有明显差异(P<)。(4)
光镜下 GFAP 的表达结果:免疫组化阳性细胞胞质及突起呈棕黄色,生理盐水对照组
胞体相对比较少,染色较淡,模型组平均光密度值最大,药物干预组较模型组均有显
著减少(P<),从高到低依次为:CBZ 组>低剂量>高剂量组,且高剂量组较低剂
量组相比,有统计学意义(P<)。(5)开放视野、强迫游泳实验:与模型组比
较,CBZ 组的各项抑郁指标无明显变化,其余两个干预组的抑郁情况均有改善,高剂
量组较低剂量比较,具有统计学意义(P<)。(6)荧光定量 PCR 结果:NS 组 5-HT1A
的基因表达量最高,PILO 组 5-HT1A 的基因表达量最少,高