文档介绍：第二军医大学
博士学位论文
应用组织芯片对脑创伤下小胶质细胞凋亡的研究及小胶质细胞
凋亡相关蛋白的蛋白质组学研究
姓名:蒋平
申请学位级别:博士
专业:生物化学与分子生物学
指导教师:焦炳华
20050401
签字目期班』,月可日学能文作者虢獭签字日期游譬月日新签墨学位论文作者签名:菊热争戽一马簧独创性声明学位论文使用授权证书申明学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以匕/本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作。除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。本人承担本声明的法律责任。本人完全了解第二军医大学有关保留、使用学位论文的规定,有权保留并向有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅。本人授权第二军医大学可以将采用影印、缩印或扫描等复制手段保存汇编学位论文。C的学位论文在解密后适用本授权书签字日期:
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中文摘要应用组织芯片对脑创伤下小胶质细胞凋亡的研究及小胶质细胞凋亡相关蛋白的蛋白质组学研究创伤性脑损伤捎谄涓咧滤缆屎椭虏新剩己成为现代社会威胁人类生存的主要疾患之一。小胶质细胞在其中起着非常重要的作用。小胶质细胞是中枢神经系统中的主要免疫活性细胞。生理条件下其功能是相对静止的;发生病理损伤时,小胶质细胞被活化,形成吞噬细胞,吞噬入侵微生物,清除死亡及受损细胞,维持和恢复中枢神经系统中的正常状态。静息的小胶质细胞缺乏吞噬功能,但具有吞饮功能和一定的迁移能力,加之其在脑内广泛而规律的分布,起到了液体净化的作用。可清除代谢产物,灭活损伤细胞释放的毒性物质。在神经系统的正常发育和损伤缒源瓷、炎症以及神经退行性变时的自我保护机制中,小胶质细胞被激活增殖后,可清除脑内细胞外氧化蛋白,吞噬细胞碎屑和溃变的髓鞘,为神经元提供一个相对适合的微环境,促进组织修复。神经系统发育到一定时期,过多的神经细胞死亡,活化的小胶质细胞起着清除死亡细胞和变性物质的作用。高浓度长时镜拇碳た傻贾滦〗褐氏赴蚬然罨蛲觯罨男〗褐氏赴置一些神经毒性因子,由于受到这些因子的刺激,神经元最终发生不可恢复的损伤。因此,对于脑创伤下小胶质细胞凋亡的研究,对于寻找新的治疗方法,降低脑创伤患者的死亡率和致残率,具有重要的意义。但是由于脑创伤的特殊性,人们往往难以得到数量充足、多种创伤程度的病理标本进行研究。基于这些情况,我们制各了点脑创伤大鼠大脑组织芯片撕。希望利用组织芯片这种高通量技术,在体内,对脑创伤条件下小胶质细胞凋亡的情况迸行全面的研究,为进一步研究脑创伤的机理奠定良好的基础。与此同时,我们建立了碳ば〗褐氏赴闚奶逋饽P模拟脑创伤条件2⒃谔迥凇⑻逋獾蛲瞿P蜕贤毖芯苛诵〗褐氏赴诮邮艽碳脑创伤、后的凋亡情况,及凋亡相关分子//谛〗褐氏摹二羊正大学博士拳位镰文
胞中的变化情况。二维液相色谱分离法是一种新兴的蛋白质组学技术。它包括液相状态下的色谱聚焦分离谝晃及无孔硅胶反相色谱分离诙,并且可以分离出低丰度及难溶水的蛋白。因此,.可以为揭示疾病发病机理、寻找新的检测指标蛋白和治疗靶点,以及新药研发提供强有力的帮助。应用芯坎钜斓鞍字首椋殉晌Q罢疑窬低臣膊〉姆肿颖昙呛鸵┪靶标最有效的方法之一。我们应用ǎ芯緼刺激前后小胶质细胞的差异蛋白质。希望能够找到:参与凋亡过程,并有关键作用的“新”蛋白酝幢ǖ拦氲亡有关徊⒔徊讲髌淇赡艿牟斡牖砗屯揪叮源锏搅私庑〗褐氏赴凋亡,进而了解脑创伤的病理过程,为进一步研发新的治疗药物和方法打下基础。本课题的研究,主要涉及到:组织芯片平台的建立和制备脑创伤大鼠大脑组织芯片;在脑创伤大鼠的体内模型和碳ば〗褐氏赴蛲龅奶逋饽型中,对于刺激源瓷耍疉蟮男〗褐氏赴牡蛲銮榭鼋醒芯浚挥τ蛋白质组学方法,对体外模型刺激前后的差异蛋白质进行鉴定,并对差异蛋白进行研究。由于采用组织芯片技术对脑创伤大鼠大脑中小胶质细胞凋亡情况进行全面的研究;〗褐氏赴钜斓鞍捉醒芯浚截至目前未见国内外相关文献报道。因此本研究的结果不仅为脑创伤条件下小胶质细胞凋亡的基础研究提供帮助,也可为治疗神经损伤及开发相关药物等临床应用提供一些资料。课题研究的主要内容包括:源瓷舜笫蟠竽宰橹酒闹票讣奥立蚋魈跫呕τ米橹酒阅源瓷讼滦〗褐氏赴蛲龅奶迥谘芯碳ば〗褐氏赴蛲瞿P偷慕⒓靶〗褐氏赴蛲鎏逋庋芯碳は滦〗褐氏赴钜毂泶锏鞍字始捌涔δ艿难芯课题研究的主要结果包括:建立了组织芯片的制各平台第酱笱