文档介绍:鼓槌石斛多糖的分离纯化、结构表征及免疫调节活性研究
Extraction, purification, structural idenfication and
immunoregulating activity of harides from
Dendrobium chrysotorum Lindl.
作者姓名王健
学位类型学历硕士
学科、专业食品科学
研究方向食品化学
导师及职称潘利华副教授
2013 年 4 月
致谢
本论文是在潘利华老师的悉心指导下完成的。在两年多的研究生生活中,
潘老师在学习和生活方面都给了我无私的帮助,在此向我敬爱的潘老师表示最
诚挚的感谢。潘老师严谨求实的工作态度、一丝不苟的科研作风潜移默化的影
响着我,使我受益终生。在这即将毕业之际,请允许我衷心的说句:谢谢您,
潘老师!
我向我的第二导师罗建平老师表示真挚的谢意!衷心感谢罗老师对我的指
导和关怀,罗老师为人师表、知识渊博、治学严谨,求真务实的科研作风使我
受益匪浅,终生难忘。在此,我要向罗老师致以崇高的敬意和衷心的感谢!
在完成论文的过程中得到了王军辉老师、查学强老师和杨雪飞老师全力帮
助,在学习和工作中遇到问题时总是能在几位老师的耐心指导下及时得到解决,
从他们那里获益匪浅,在此向他们表示最由衷的谢意!感谢余顺火老师和陈晓
燕老师在实验完成过程中在仪器设备使用方面的热心说明;
感谢合肥工业大学生物与食品工程学院为我提供了一个较高的科研平台、
优雅的学习环境和浓厚的学习氛围,使我在此这两年多的学习时间里,感觉很
幸福!在我向中国科学技术大学理化实验中心的庞文民老师和王岩松老师在核
磁实验过程中给我巨大的帮助!
感谢本实验室的赵宏伟师兄、姜苏薇师姐、李秀芳师姐和各位师弟师妹们
的热情帮助,借此机会向他们表示真诚的感谢!
特别感谢我的家人几年来对我生活和学习的支持,为我顺利完成学业提供
了物质保证和精神动力。
作者:王健
2013 年 4 月
鼓槌石斛多糖的分离纯化、结构表征及免疫调节活性研究
摘要
鼓槌石斛(Dendrobium chrysotorum Lindl.)是兰科石斛属中的一种药食兼
用植物,具有滋阴清热、生津益胃、润肺止咳等功效,多糖是其发挥生理活性
功能的物质基础。本文在分析鼓槌石斛营养组成的基础上,优化了鼓槌石斛多
糖脱蛋白方法,并对水溶性鼓槌石斛多糖进行了分离纯化、结构表征及免疫调
节活性研究,得到以下结果:
(1)营养成分测定表明,鼓槌石斛总糖、还原糖、粗脂肪、蛋白质和灰分
的含量分别为 、、、 及 g/100g DW。
(2)经热水、碱、酸提取,分别得到水溶性总多糖(DCP-W)、碱溶性总
多糖(DCP-B)和酸溶性总多糖(DCP-A), 它们的得率分别为 %、%
和 %,脾细胞增殖实验显示 DCP-W 的免疫活性明显高于 DCP-B 和 DCP-A。
(3)Sevag 法、TCA 法、木瓜蛋白酶法、木瓜蛋白酶联合 Sevag 法四种脱
蛋白方法试验结果显示,木瓜蛋白酶联合 Sevag 法对鼓槌石斛水溶性多糖的脱
蛋白效果最佳,其蛋白脱除率达到 %,多糖损失率仅为 %。
(4)通过 DEAE-Cellulose 阴离子交换层析及葡聚糖凝胶层析分离,从
DCP-W 获得了 3 个均一组分:DCP-W1、DCP-W2 和 DCP-W3,它们的平均相
对分子质量分别为 × 104 Da、 × 106 Da 和 × 106 Da。通过 FT-IR、
GC、GC-MS、NMR 等仪器分析及全水解、甲基化等化学分析方法,得出 DCP-W1
由摩尔比为 : 的 Man 和 Glc 组成,DCP-W2 由摩尔比为 : : :
的 Ara、Man、Glc 和 Gal 组成,DCP-W3 由摩尔比为 : : : : :
的 Rha、Ara、Xyl、Man、Glc 和 Gal 组成,并推断得到 DCP-W1、DCP-W2
和 DCP-W3 的可能结构如下:
DCP-W1 的重复结构单元为:
α-D-Glcp(1→4)-α-D-Glcp
1
↓
4
→1)-α-D-Glcp-(6→1)-α-D-Glcp-(6→1)-α-D-Manp-(4→1)-α