文档介绍：中国科学院大学硕士学位论文年月
致谢本论文是在我的导师刘峰研究员的悉心指导下完成的。研究生阶段的三年多来导师总会在我懈怠的时候给予谆谆教诲,在我遇到困难时给予信任,督促我改正缺点,不断进步。导师严谨的治学态度,勤奋的工作精神值得我认真学习。在此,谨向我的导师刘峰研究员表示由衷的感谢和敬意感谢实验室的众多兄弟姐妹们,三年的朝夕相处使我们彼此都成为了朋友,大家相互学习共同提高,氛围非常融洽,是他们让我的研究生生活充满了快乐。感谢王璐师姐和吕军华在本课题中给予的帮助。感谢我的父母,在我求学道路上给予的精神和物质的双重支持,没有他们的理解和支持,就没有我的今天。感谢所有帮助过我的人
摘要强::转基因斑马鱼系,通过流式细胞分选技术得到了数批对造血干细胞发生机制的研究有助于了解人类白血病的发病机理,从而找出更为有效的治疗方案。本课题用斑马鱼作为实验模型,成功构建了可稳定遗传的性的斑马鱼体细胞用于疃炔庑颍又猩秆〕喔鲈诙鲂韵僦猩蛴刑匾毂泶锏幕颍梅匆宓ズ塑账峄蚯贸际醴⑾至似渲有数个基因都对造血干细胞发育有影响。最后,我们挑选出其中的两个基因和,并初步研究探讨了它们影响造血干细胞发育的机理。关键词:斑马鱼,造血干细胞,发育,反义单核苷酸,基因敲除
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目录第一章绪论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯甀斑马鱼造血干细胞的发育过程⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.⒂⒂闹匾;蚣靶藕磐贰研究造血干细胞发育常用的转基因鱼系⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.本课题的研究内容和意义⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯斑马鱼饲养及胚胎的收集⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..和显微注射技术⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯转基因斑马鱼的构建⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..荧光照片的拍摄⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.üü庀晕⒕⒕档氖褂谩分子克隆⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯...躌的提取⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯...印.
::侧的构建⋯.⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..;.銹⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..√嶂柿!.⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.整体原位杂交⋯⋯⋯⋯⋯.⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯冰冻切片⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯蛋白免疫印迹⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯...〖2街琛魇较赴盅〖际酢胚胎上样细胞的准备⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..流式细胞分选⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..奶崛『蜕疃炔庑颉第三章实验结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯,:刷:是一种新的标记造血干细胞的转基因鱼⋯⋯⋯⋯::⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.疃炔庑蚪峁治觥和影响⒂淖饔没啤和的背景介绍.⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯和影响造血于细胞的发生⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯和的作用机理⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.第四章分析和讨论⋯⋯.⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.⋯⋯和作用机制的分析.⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..。
讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..个人简历⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..发表论文⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..
⒂斑马鱼作为一种模式生物有其许多优点,第一,与小鼠模型不同,斑马鱼是体外受精,这有助于研究胚胎的早期发育状况。第二,斑马鱼胚胎在其早期阶段是透明的,这对于活体状态下研究胚胎内部器官的发生和发育有很大帮助,比如血管生成,心脏形成等。第三,与小鼠模型相比,斑马鱼产卵周期短,一次性产卵所得胚胎更多,而且胚胎发育速度更快,从而使得斑马鱼的研究周期更短,效率更高。最后,斑马鱼中调控造血发育的遗传背景很保守,这就使得对其的研究可以同样应用于其他高等生物【俊S捎诰弑敢陨嫌攀疲冒呗碛阊芯吭煅8细胞的发生发育状况有助于阐明人类白血病的发病机理,从而为治愈白血病提供新的思路造血是指产生各系血细胞的过程,所有脊椎动物的造血过程都有两个阶段:初级造血和次级造血【。在哺乳动物中,初级造血过程在胚胎外卵黄囊中发生,期间主要产生一些红细胞和早期髓系细胞,而在斑马鱼中,初级造血在中部细胞团/和腹侧血岛/产生【俊初级造血产生的血细胞仅能维持胚胎发育早期的供血,胚胎发育后期乃至成体的血液供给都要由次级造血