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轻。万作者签名:物露烂杨瞄蘑口“学位论文版权使用授权书浙江工业大学学位论文原创性声明日期:纱年驴笕本人郑重声明:所提交的学位论文是本人在导师的指导下,独立进行研究工作所取得的研究成果。除文中已经加以标注引用的内容外,本论文不包含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果,也不含为获得浙江工业大学或其它教育机构的学位证书而使用过的材料。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本人承担本声明的法律责任。年本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定,同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅。本人授权浙江工业大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。本学位论文属于作者签名:导师签名:⒈C芸冢年解密后适用本授权书。⒉槐C芸凇朐谝陨舷嘤Ψ娇蚰诖颉啊日期:月日
一种嗜热嗜碱过氧化氢酶的生产、时表现出最佳活性。纯化后的酶‰,.是一种高效催化分解过氧化氢的酶,广泛存在于好氧生物中。在纺织印染工业和造纸工业中产生的漂白废水处理,牛奶保鲜以及临床分析等方面有着非常广泛的应用。本文对嗜热子囊菌发酵生产过氧化氢酶的条件进行了一定的优化,所产粗酶经三步分离纯化步骤后分离得到电泳纯度的过氧化氢酶并获得了关于该酶的一些基本数据。经壳聚糖载体固定化后,固定化酶稳定性、温度稳定性均有所提高。同时对固定化酶去除的应用做了一个初步研究,这些结果表明该酶在纺织工业处理漂白废水中残留的过氧化氢环节中具有良好的应用前景。通过对该菌所产的一种过氧化氢酶发酵液进行硫酸铵分级沉淀,透析除盐及过阴离子交换柱等处理,分离得到达到电泳纯度的单一蛋白条带。,,非变性凝胶电泳,被证实为单一蛋白质,初步鉴定为双亚基结构,过氧化氢酶分子量6愿妹感灾恃芯糠⑾郑妹副硐殖隽私虾玫哪腿饶图钚灾省8酶在到℃,渚鼙硐殖鼋虾没钚裕渲性和为韌。/5浙江工业大学硕士学位论文
以戊二醛作交联剂将过氧化氢酶固定在壳聚糖载体上,最佳优化条件:壳聚糖载体,浓度为ノ於┤芤海嫦反应票腹潭ɑ靥澹用噶℃下静置罩狗从Γノ捶从Φ拿浮9潭ɑ该富盍ξ酶活力保留率为.%。研究发现固定化酶稳定性,温度稳定性均进一步提高,最适反应温度℃,最适反应为,重复使用螅潭ɑ该富盍Σ辛袈嗜栽诔跏贾档ヒ陨稀关键词:嗜热子囊菌,嗜热嗜碱过氧化氢酶,分离纯化,壳聚糖,固定化次总计痝,浙江工业大学硕士学位论文Ⅱ
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目录摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯第一章绪论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯过氧化氢酶的概述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.蛋白质分离纯化⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.固定化酶制备及研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.本论文的研究内容和思路⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.第二章嗜热子囊菌过氧化氢酶的发酵优化⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.实验结果和讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.本章小结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一第三章过氧化氢酶的分离纯化及性质研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯材料和方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一结果和讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯...⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.乙醇沉淀蛋白⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.透析除盐⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..阴离子交换层析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..分离纯化数据表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..过氧化氢酶的稳定性⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯...