文档介绍：第三章灭活剂、保护剂
与免疫增强剂
第一节灭活剂
灭活与灭活剂
(一)灭活:杀死病原微生物,但不影响免疫原性
其次是破坏血清的补体,以免干扰血清学反应结果。
灭活剂:灭活微生物的化学试剂
灭活方法:物理灭活:加热、超声波及射线灭活微
生物,此方法免疫原性易破坏,现很少使用(血清
56°C半小时灭活补体用此方法)。
化学灭活:用化学试剂将病原微生物杀
死,此方法经常使用
二、常用的灭活剂种类和原理
)甲醛:是最古老常用的灭活剂,现在我
国用的26种灭活疫苗,均以甲醛为灭活剂
性质:甲醛为刺鼻的气体,水溶液叫福尔
马林,浓度为36%-40%。10°C以下易聚合成
三聚甲醛或多聚甲醛,为白色沉淀。
原理:甲醛的醛基起灭活作用,可使
蛋白质的氨基→羟甲基胺
羧基→亚甲基二醇单酯
羟基→羟甲基酚
巯基→硫代亚甲基二醇
浓度:需氧菌甲醛浓度到0、1%-0、2%
厌氧菌0、4%-0、8%
病毒0、05%-0、4%.
原则是浓度低,时间短,温度低可以灭
活细菌,尽量减少破坏抗原(通常加入量,以
甲醛含量量计算,折合福尔马林浓度)。
疫苗名称
灭活剂与浓度
灭活、脱毒方法
气肿疽明矾灭活疫苗
%甲醛
37-38℃
72-96h
气肿疽甲醛灭活疫苗
%甲醛
37~38℃
72~96
肉毒梭菌(C型)灭活疫苗
%甲醛
37
羊快疫一猝疽一肠毒血症三联灭活疫苗
%-%甲醛
37~38℃
3~7d
家兔魏氏梭菌氢氧化铝灭活疫苗
%甲醛
36-37℃
5d
羊大肠杆菌病灭活疫苗
%甲醛
3T℃
24~48h
猪丹毒、猪肺疫氧氧化铝二联灭活疫苗
%甲醛
18-24h
猪丹毒氢氧化铝灭活疫苗
%-%甲醛
3T℃
18-24h
牛出血性败血病氢氧化铝灭活疫苗
%~%甲醛
37t
7~18h
猪肺疫氢氧化铝灭活疫苗
%甲醛
37C
7-12h
禽霍乱氢氧化铝灭活疫苗
%甲醛
370
7-12h
禽霍乱油乳剂灭活疫苗
1%甲醛
37C
12
山羊传染性胸膜肺炎氢氧化铝灭活疫苗
%甲醛
兔出血热组织灭活疫苗
%甲醛
37t
12-24h
牛、羊伪狂犬病灭活疫苗
%甲醛
4~10℃
7d
破伤风明矾沉降类毒素
%甲醛
38t
21-31d
口跨疫灭活疫苗
%%EE120-37℃
二)烷化剂:将烷基引入,形成烷基取代物,使微
生物变性死亡
原理:主要破坏病毒的核酸,作用于A:G碱基,引
起DNA单链断裂或双链铰连。
此类常用于病毒灭活,种类有AE|-N-乙酰乙烯亚胺,
加入浓度到0、05%。
BE|二乙烯亚胺,浓度0、02%;EE|2—乙基乙
烯亚胺,GDA_缩水甘油醛。
灭活后加硫代硫酸钠可终止灭活,防止抗原损失
保存:AE|,0-4°C一年,-20°C二年;BE|0
4°C保存一个月。
(三)苯酚(石碳酸)人类用的第一个消毒
药,具有特殊气味的无色结晶,易潮解成水溶
液,与光、氧后颜色变紫色。
原理:蛋白质变性以及抑制氧化脱氢酶,芽孢
和病毒对它抵抗力强。
灭活浓度:抑菌作用是0、2—0、5%(血清防
腐),杀菌是1%,杀葡萄球菌是3%。
消毒常用它的衍生物,来苏儿(甲酚皂)3
5%浓度,特殊气味,覆盖其他气味,也是医
院常用的。
(Joseph Lister, 1827-1912
首创用石炭酸喷洒手术室
和煮沸手术用具以防术后
感染,为防腐、消毒,以
及无菌操作奠定了基础。
(四)结晶紫(龙胆紫),也叫紫药水,碱性
染料,也叫甲紫或甲基青莲,化学名,六甲基
副玫瑰苯胺。
原理:碱性阳离子可结合细菌阴离子羧基;干
扰细胞壁粘肽合成;常作用于革兰氏阳性菌。
生物制品的应用有猪瘟结晶紫疫苗,鸡白痢染
色抗原。