文档介绍：.;计黼眯氏常中文摘要我国骨资源丰富,但是在骨资源利用上存在极大的浪费,酶解骨蛋白生产高质量的蛋白胨,是一条提高畜骨资源利用的有效途径。蛋白胨是蛋白质经水解之后形成的由际、胨、多肽和氨基酸等组成的混合物,主要用于各种微生物的培养提供础本研究采用低温蛋白酶水解牛骨蛋白,利用单因素实验研究在不同温度,,酶的添加量,反应时间对牛骨蛋白水解的影响,并在此基础上,筛选出龆悦解效果影响显著的因素:温度、时间、;进一步利用响应面法对筛选出的因素进行蛩水平优化,获得低温蛋白酶水解牛骨蛋白的最优条件为:温度,,酶的添加量/。优化后,测得牛骨蛋白水解产物的氨态氮含量达到ァ为了进一步考察低温蛋白酶水解牛骨蛋白过程中各因素之间的相互作用,本文设计了水解动力学实验,根据实验数据及公式推导得到低温蛋白酶水解牛骨蛋数为疞,较小,表明酶与底物的亲和度比较大;最大反应速率为疞.,较大,表明酶解反应能够很快到达反应终点;测得反应活化能为/罨芙系停得鞯臀碌鞍酌付晕露缺冉厦舾校温容易使酶失去活性。酶解动力学实验结果为日后发酵生产提供参数依据,采用低温蛋白酶,水解温度一般低于中温酶,同时所用的水解时间很短。目前蛋白胨产品主要以氨氮、总氮含量作为质量检测的指标,而蛋白胨中多肽片段大小及分布显著影响微生物对蛋白胨的利用。本文对牛骨蛋白水解产物进行凝胶电泳检测,结果表明水解液中的肽段呈连续性分布,在渚蟹植迹孀攀奔涞难映ぃ蠓肿拥碾亩沃鸾ケ凰獬尚分子的肽段。为了进一步确定水解产物的肽段分布,本实验选取时间琾一、
㈣炒一一撇敝址肿恿糠段Р煌哪翰阄觯獾门9堑鞍姿解物中多肽分布为:亩嚯恼寂9堑鞍纂俗芰康ィ亩嚯ィ∮亩肽.%。氨基酸含量检测结果表明:牛骨蛋白水解后游离氨基酸总量高于水解前游离氨基酸的.%,其中必需氨基酸占总量的.%,半必需氨基酸占总量与商品蛋白胨和胰蛋白胨对比结果显示,牛骨蛋白胨的氨态氮含量高,但是葡聚糖层析结果显示牛骨蛋白水解液中小分子多肽含量低于商品蛋白胨和胰蛋白胨,氨基酸分析结果表明牛骨蛋白水解后游离氨基酸含量均明显高于商品蛋白胨和胰蛋白胨。这一点也解释了为什么低温蛋白酶水解牛骨蛋白产物检测氨态氮含量高;而小分子多肽片段分布少。关键词:牛骨蛋白,低温蛋白酶,酶解反应动力学,多肽分布,游离氨基酸;.的多肽.%,..琒
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