文档介绍：中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..符号说明⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.⋯⋯⋯⋯⋯⋯.讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.⋯⋯⋯⋯⋯.小结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯实验研究二抗系膜增生性肾炎大鼠模型的基因表达谱分析⋯⋯⋯⋯..材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..实验研究三转录因子韵的は赴鲋车挠跋臁全文总结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.综:述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯攻读学位期间发表的学术论文⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.原创性声明⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..录目实验研究一抗系膜增生性肾炎大鼠模型的制备
⋯⋯圳川㈣咖删《Ⅲ川究的目的在于寻找可能抑制抗啦的ぴ錾陨鲅状笫竽P椭邢的は赴鲋车南喙制备抗哪的ぴ錾陨鲅状笫竽P停觳獠煌奔涞、、、天抗大鼠模型的基因表达谱分析研究生:洪权专业:病原生物学中文摘要量探针法圆糠衷鲋诚喙氐牟钜毂泶锘&.或卯.,且选基因。同时培养大鼠系膜细胞癿,设计合成抑制Ⅺ腰表达的,利用导师:于爱莲教授伽印“⑸湮鷖笫小球疾病中最常见的病理类型之一,约占我国肾活检病人的%左右,其主要的病理变化是系膜细胞鼯,脑鲋澈拖的せ食粱C庖哐字ⅰ⒁糯ǖ榷嘀治疗措施。既往研究多集中于寻找促进系膜细胞增殖的基因,对其进行调控以达到延为切入点,探讨这部分因子在系膜细胞增殖过程中所起作用。一般认为,增殖因子下调。到恢复期时,促增殖因子下调而抑制因子上调。基于这一思路,本研方法分类,重点分析增殖期天和内与增殖进程相关的基因群表达情况。荧光定砌蛹际跚玫蚏中勋狶籰谋泶铮⒁晕薰豷矾目的系膜增生性肾炎鼢撕因素可导致促进/抑制系膜增殖的平衡紊乱,随后出现的持续性系膜增殖和系膜基质积聚最终引起不可逆性的肾小球硬化。抑制系膜细胞过度增殖是系膜增生性肾炎的重要缓或防治疾病进展的目的,但其效果并不理想。因此我们以寻求抑制系膜增殖的因子进展的は赴鲋过程中,增殖期内促进系膜细胞增殖因子上调而相拮抗的抑制基因,并对其抑制系膜细胞增殖的功能进行体外验证。的肾功能和虻鞍祝羧∩鲎橹掷肷鲂∏虿⑻崛∽芏远。利用大鼠芯片进行扫描,软件分析所得数据获得差异表达基因群及基因功能的蜊,獀現.%醒橹ぃ秆】赡芤种葡的は赴鲋车暮甇
对照,。实验分组:无血清组;正常对照组;拮H咀椋缸H炕龅目筎固逍Ъ鄹摺⒋慷雀摺⑻匾煨院茫⒗酶每固逯票噶丝估因Ⅺ。的麂梁偷鞍妆泶锼絧.。觳饨峁砻鳎瑂砒橄赴狙芯坷么炕蟮拇慷雀摺⑻匾煨院谩⑿Ъ鄹叩目菇舕抗体,制备了抗哪胞周期相关蛋白、加皃的表达均上调琻习’鶥凹浣用庖哂ü饧觳庀赴芷诘鞍證、谋泶锉浠著升高.,,而第天后开始下降;组。腿后,笛楹土魇较赴羌际醴治鱿赴鲋郴钚约跋赴芷诘母谋淝榭觯能、分子转导功能、转运功能、转录调节功能以及酶调节等功能。砑云进一步分析表明,增殖期和恢复期中与细胞增殖进程相关的差异基因分别为个、个天第天第天U獠糠只蛑校蚪等。荧光定量哉獠糠只蚪醒橹ぃ峁砻骰虻谋泶锉浠魇朴牖蛐酒觳饨峁胝W榧皊转染组相比,合成的疉可特异抑制筛选出的转录调控基免疫印迹及间接免疫荧光检测结果表明,与拮榧罢6哉兆橄啾龋瑂橄结果系膜增生性肾炎大鼠模型:与对照组大鼠相比,模型组大鼠第旌偷天肾小球系膜细胞增殖明显,而天和天逐渐降低。虻鞍锥刻氐阄5天和天显蛐酒布觳獾鲆阎;颍渲兄辽僭谝桓鍪奔涞阌攵哉兆橄啾扔差异表达的有个基因,已知功能的基因为觯饕9δ芪=岷瞎δ堋⒋呋天和第熘谐鱿稚系髑铱赡芫哂幸种圃鲋彻δ艿幕蛴蠯、等,第和第斐鱿稚系髑揖哂写俳鲋彻δ艿幕蛴’冢、致,皮尔森检验相关系数琾.,Ⅱ多,经流式细胞仪分析证实,与橄啾龋τ赟期细胞明显增多,琻。结论大鼠模型;没蛐酒蜕镄畔⒀Ъ际醴治龌竦每瓜的ぴ錾陨鲅啄P偷募膊〗构程中差异基因表达谱,并筛选出部分增殖相关基因;种漆俳谋泶锖螅沙鱿窒的は赴闹芷诘鞍證和表达水平发生改变,从而使谙的は赴龆啵崾劲谙的は赴鲋彻讨邪演重要的角色,为调控系膜细胞增殖的研究提供了新的思路。.
关键词系膜增生性肾炎;基因芯片;细胞周期;转录因子;脚
帅觚眦簅舕—薮⑵鰃、懈,,嘶弛卸锄骼许蕂玉陆而西〕歉譻似韎或硫即∞閛百鎐穸硫抽蹦,砌.,希甌鯾锄坶堍∞哆:Ⅱ他撕顁匏骸VⅡ.╝虹,柚黟鵢硒辝譱侬犯,,,觚琺篗觚瑉、