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牙鲆抗菌肽Hepcidin基因表达分析及真鲷重组抗菌肽抗菌活性研究.pdf

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牙鲆抗菌肽Hepcidin基因表达分析及真鲷重组抗菌肽抗菌活性研究.pdf

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文档介绍:研究生学位论文髅辱中国海洋大学堑继匿检挞班窥虽亟主绁胞生塑堂论文答辩日期簧斓上皇谟枞掌鲤斓研究生姓名指导教师姓名申请学位级别专业名称
牙鲆抗菌肽基因的表达分析及真鲷重组抗菌肽的抗菌活性研究摘要翻蜕啊⒙膛Ц司鶳抗菌肽巧锩庖叻烙低车闹匾W槌桑广泛分布于多种生物,具有分子量小、耐热、广谱抗菌等特性。本文研究了牙鲆抗菌肽基因在不同发育时期胚胎中和在不同组织中的表达分析以及真鲷重组抗菌肽的抗菌活性。采集牙鲆不同发育时期的胚胎样品,依次为受精后:∈细胞期小时ζ、小时窬咂、小时〗谄、小时惭科、小时奶、小时忝缙;采集牙鲆成鱼肝脏⑵⒃小肠⑷⑿脑和头肾橹贰@用试剂盒提取蟹醋B嫉玫絚婧笸ü匾煨砸锢┰基因和内参籥基因,分析牙鲆抗菌肽基因在不同发育时期胚胎中和在不同组织中的表达。结果表明在牙鲆胚胎发育过程中的表达量随发育时间的增加而逐渐增强,在鱼苗期达到最大;在成鱼不同组织中的表达量也存在很大差别,在肝脏、脾脏和头肾中表达量较大,在心脏、鳃中的表达量较少,而在小肠中几乎没有。用数种革兰氏阳性菌、阴性菌和水产动物病原菌作为供试菌株对真鲷重组抗菌肽的诱导表达上清及超滤浓缩液进行抗菌活性研究。结果表明重组抗菌肽对大肠杆菌以及水产动物病原菌嗜水气单胞菌有明显的抑制作用,对其它菌株效果不是很明显。关键词:抗菌肽;表达分析:抗菌活性
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第一章抗菌肽的特点及水产动物抗菌肽的研究进展第一节抗菌肽的特点咕母攀咕牡闹掷等方面进行了研究。抗菌肽具有抗革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌、真菌、病毒、抗菌肽,巧锾迥诓糠烙低车闹匾W槌部分。它是生物体内持续存在或由外源病原体诱导产生,由基因编码、核糖体合成的具有广谱抗细菌、抗真菌、抗原生生物和抗内毒素的活性多肽。目前已知的抗菌肽有几百种,年代初瑞典科学家热恕状未酉Ч疟忍觳球拍蛹中诱导分离得到动物抗菌肽4撕笮矶嗍笛室相继从其它真核生物中得到多种抗菌肽,并对他们的遗传免疫性、寄主防御系统、与生物膜的相互作用、蛋白修饰、体外基因表达和体内的基因调控表达原生动物的能力。此外,它还具有稳定、水溶性好,对高等动物正常细胞无害等特点。由于抗菌肽这些独特的性质,近年来已成为分子生物学、免疫学研究的热点。抗菌肽的分离纯化、氨基酸序列的分析、蛋白质结构和功能的关系、抗菌肽的作用机理也有很多报道。它们在医药、农业等方面越来越表现出诱人的应用前景。生物界中抗菌肽的分布十分广泛,目前已从哺乳动物、植物、昆虫、两栖类以及微生物中分离纯化出抗菌肽。下面将对几种典型抗菌肽分别进行介绍。哺乳动物产生的抗菌肽哺乳动物中的抗菌肽是由吞噬细胞和黏膜上皮细胞表达的,主要分为两类:一类是细胞产生的广谱防御素霭被嶙槌桑⒖伺牙鲆抗葡肽基凶的表达分析及真鲷重组抗菌肽的抗菌活性研究
第一章抗菌肽的特点及水产动物抗菌肽的研究进展第一节抗菌肽的特点抗菌肽概述∞。咕牡闹掷抗菌肽,巧锾迥诓糠烙低车闹匾W槌部分。它是生物体内持续存在或由外源病原体诱导产生,由基因编码、核糖体合成的具有广谱抗细菌、抗真菌、抗原生生物和抗内毒素的滔性多肽。目前己知的抗菌肽有几百种,年代初瑞典科学家热刷笫状未酉д急忍觳蛹诱导分离得到动物抗菌肽4撕笮矶嗍笛室相继扶其它真核生物中得到多种抗菌肽,并对他们的遗传免疫性、寄主防御系统、与生物膜的相互作用、蛋白修饰、体外基因表达和体内的基因调控表达等方面进行了研究。抗菌肽其有抗革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌、真茼、病毒、原生动物的能力。此外,它还具有稳定、水溶性好,对高等动物正常细胞无害等特点。由于抗菌肽这些独特的性质,近年来已成为分子生物学、免疫学研究的热点。抗菌肽的分离纯化、氨基酸序列的分析、蛋白质结构和功能的关系、抗菌肽的作用杌理也有很多撤道。它们在医药、农业等方面越来越表现出诱人的应用前景。生物界中抗菌肽的分布分广泛,目酊已从哺乳动物、植物、昆虫、两柄类蛆及微生物中分离纯化出抗菌肽。下面将对几种典型抗菌肽分别进行介绍。溉槎锊目咕哺乳动物中的抗菌肽是由吞噬细胞和黏膜上皮细胞表达的,主要分为两类:一类是细胞产牛的广谱防御素霭被嶙槌桑⒖伺一类是细胞产生的广谱防御素个氨基酸组成,微克浓牙奸抗菌肚基凶的表达分析及真鲷重组抗菌肚的抗菌活性研艽
:㈣从猪小肠纯化而得,含个氨基酸,分子量度就能杀死革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌、肿瘤细胞和其它包被病毒;另一类是序列、结构和氨基酸数目极不相同的一组抗菌肽,但它们有共同的┒诵列,而且保守区与巯基蛋白酶抑制剂同源【俊1嗦胝饫嗫咕牡幕因具有相似的结构。它们在微克浓度就可杀死革兰氏阳性和阴性细菌。¨篸均含龇肿幽诙蚣霭被嶙槌桑分子量约为W畛跏谴与嗍蠛屯米拥亩嘈魏耸戎行韵赴蟹掷氤隼矗在大鼠中性粒细胞、小鼠小肠上皮、兔巨噬细胞和中性粒细胞也分