文档介绍：第卷第期河北农业大学学报..
年月.
文章编号:———
抗菌肽的原核表达与抗菌活性分析
卢艳敏。, 崔海信, 王承民。, 何宏轩。
.中国农业科学院农业环境与可持续发展研究所,北京;
.衡水学院生命科学系,河北衡水;
.中国科学院动物研究所动物生态与保护生物学院重点实验室,国家野生动物疫病研究中心,北京
摘要:根据氨基酸序列,选用大肠杆菌偏爱密码子,化学合成了个片段,利用重叠区互补
法得到Ⅱ的基因序列。构建了融合表达载体—,转化大肠杆菌
,诱导表达,表达产物经分析,在. 处可见目的蛋白条带,经检测表
明成功地在大肠杆菌中表达了融合蛋白。诱导温度在℃,终浓度为./,诱导时间为,融
合蛋白表达效果较好,且主要以可溶性形式存在,对纯化得到的融合蛋白进行活性分析,抑菌活性试验表明,表
达产物对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均有抑制作用。
关键词:;抗菌肽;融合表达;抑菌活性
中图分类号:. 文献标志码:

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收稿日期:——
基金项目:中国科学院绿色农业技术集成与发展中心创新方向项目.
作者简介:卢艳敏一,女,河北省冀州人,在读博士生,主要从事抗菌肽的研究工作.
通讯作者:何宏轩一,男,河南省内乡人,博士,研究员,从事野生动物疫病防治研究工作.—: ...
河北农业大学学报第卷
抗菌肽是生物体内经纯化柱子购自公司,其他试剂均为
诱导产生的一种具有生物活性的多肽,它是天然免分析纯。
疫的重要组成部分,具有相对分子质量小、强碱. 方法
性、热稳定性、水溶性好、无免疫原性以及广谱抗菌.. 基因的合成根据氨基酸序列
等特点。第一个被发现的抗菌肽是年由瑞典,选用大肠
,
。随后在细菌、真菌、两栖类、昆虫、高等因片段,添加酶切位点,基因片
植物、哺乳动物甚至人体内发现并分离到具有抗菌段由上海英俊生物技术有限公司合成,序列如下:
活性的多肽。抗菌肽具有多种功能,不仅对细菌、真:—
菌、病毒、原虫、及癌细胞有杀伤活性,还在免疫
调节、激素调节及刺激伤口愈合等方面有重要作用。
目前,由于传统抗生素的滥用,导致细菌产生抗: —
药性,引起畜禽内源性感染和二重感染,在畜产品和
环境中造成残留,严重地威胁着人们的健康。为了
饲料工业和畜牧业的健康发展,迫切需要开发新型采用重叠区基因扩增法,利用末端互
的抗菌药物。抗菌肽广谱抗菌,且作用机制独特,不补、重叠延伸原理,和片段互为模板互为引
易使病原菌产生耐药性突变,对正常的真核细胞几物进行扩增,得到目的片段。
乎不产生作用,因此抗菌肽作为抗生素的替代品在.. 扩增反应体系为:.“的
饲料添加剂及畜禽疾病治疗与预防中具有广阔的应×, 的, 的,.
用开发前景。肚的灭菌。程序:℃预变性;
抗菌肽是一类碱性多肽,年—℃变性,℃退火,℃延伸,
从非洲爪蟾的皮肤中分离得到,它对个循环;℃延伸。产物经琼脂糖
革兰