文档介绍：华中科技大学
硕士学位论文
靶向survivin核酶和siRNA诱导肿瘤细胞凋亡研究
姓名:刘红云
申请学位级别:硕士
专业:免疫学
指导教师:沈关心
20060401
靶向核酶和盏贾琢鱿赴蛲鲅芯中文摘要结果:体外细胞模型研究结果表明:①转染嵌合体硕士研究生:导师:刘红云沈关心教授目的:构建噬菌体泶颮与靶向核酶及那逗咸澹研究其沉默基因的表达及其诱导肿瘤细胞凋亡的效应。方法:构建/和/逗咸澹τ脂质体转染技术,将其转染入人肿瘤细胞株和细胞。ü怪显微镜、倒置荧光显微镜以及疨竞罅魇较赴检测实验组与对照组肿瘤细胞凋亡率。的人乳腺癌细胞株与转染突变体/及未转染对照组比较,转染/嵌合体的人肿瘤细胞株表达水平显著降低,转染突变体/与未转染对照组比较无显著差异;②转染//逗咸搴螅胞凋亡率明显增高;③通过共转染泶镏柿:蚿痵螅捎倒置荧光显微镜和觳饨峁砻鳎琾痵上灾聊珿的表达,而/逗咸宥訥的表达无抑制作用,表明/逗咸宓淖饔镁哂懈叨忍匾煨浴结论:/和/逗咸迥芄惶匾性沉默肿瘤细胞中基因的表达,增加肿瘤细胞的凋亡率,有抗瘤效应,表明可作为小分子治疗物质的有效载体。关键词:核酶,干扰蛲觯琾琾,基因沉默华中科技大学同济医学院硕士学位论文
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英文缩写与汉语名称对照靶向的核酶突变体和嵌合体QG灏椎鞍ゲ笵一沽姿嵫攀筊乙二胺四乙酸二钠磷酸盐缓冲液聚合酶链反应孀B糚实时定量一寡聚胸腺嘧啶核苷酸引物/敢种萍魇较赴//
保密区在—杲饷芎笫视帽臼谌ㄊ椤学位论文作者签名:§互≯毛独创性声明学位论文版权使用授权书本人声名所呈交的学位论文是我个人在导师的指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知,除文中已标明引用的内容外,本论文不包含任何其他人或集体已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名:日期:年本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定,即:学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅。本人授权华中科技大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。本论文属于不保密口。朐谝陨戏娇蚰诖颉冢月日指导教师签名:
前言毒的分子之一。但有效的核酶和干扰魽治疗分子必须具备以下特征:①能够穿过细胞膜进入细胞内:②不能被胞浆内的核酸酶降解;③不能被内体和溶酶体破坏;④能到达细胞内合适的作用区域;⑤负载于载体上的核酶能够正确折叠;本课题组前期研究已经发现基因在人肿瘤细胞中高度特异性表达,例如在缓塑账嶂盎蛘位核苷酸之后替换或者插入核苷酸不影响核酶【和干扰】是一种通过下调特异性基因表达的抗肿瘤及抗病⑥特异性识别靶细胞。并且已经证明的反义芄挥盏级嘀种琢鱿赴牡蛲鯷’H欢义诎谌菀妆唤到庖蚨饔枚淘荩业ザ朗褂梅匆錜作用特异性较低。为了克服反义肿拥纳鲜鋈钡悖颐枪菇艘恢钟蓀T靥宓膕,核酶嵌合体分子。这种由噬菌体嗦氲男》肿覴已经被证实在该病毒包装过程中起着关键作用,进一步研究发现六个相同的这种小分子纬傻幕纷戳厶錥科鹱徘删錺包装的马达作用每个分子包含两个功能域:,第二个功能域挥谂涠缘,末端斡雙马达的包装作用川,而且去掉包装功能域不影响分子间相互作用的特性,分子二聚体,三聚体和六聚体的生成【。因此,分子的双链螺旋状/┒丝梢员挥美葱庠捶肿有蛄小我们研究发现将分子上可以连接上各种小分子物质如与细胞表面受体特异性结合的璦、核酶、干扰⒁端岬茸槌梢桓銮逗咸澹庵由分子和治疗小分子组成的嵌合体既不影响分子间多聚体的形成,也不影响其所携带治疗小分子的功能【’1究翁庾楣菇藀肿佑氚邢的核酶和干扰肿拥那逗咸澹ò邢騭虻母扇臨和核酶连接到分子上,拟研究其在诱导肿瘤细胞凋亡中的效应。华中科技大学同济医学院硕士学位论文。
材料三、℃左右,在无菌条件加入卡那霉素张ǘ痬混匀,缓慢倒入平皿自然冷凝。主要仪器设备咚俚臀吕胄幕ㄊ礁咚倮胄幕觳庖上海枫林中加合资生物有限公司瓹培养箱/、∥琋摇动溶解,用调值至甇,补足双蒸水至,。柿和提取纯化试剂芤篒:葡萄糖一、,二、狧华中科技大学