文档介绍：温州医学院
硕士学位论文
COX-2反义寡核苷酸抑制宫颈癌Hela细胞的研究
姓名:李淞漪
申请学位级别:硕士
专业:妇产科学
指导教师:帅茨霞
20050501
■叶垦琼焦炭酸二乙酯脱氧核苷酸乙二胺四乙酸信使核糖核酸阴甲基偶氮哗盐非带体类抗炎药物磷酸特缓冲液日腺素逆转录聚合酶链反应反义核苷酸『搴塑账英文全称,—址州医学院坝宦哿甈狾癰
反义寡核苷酸抑制宫颈癌细胞的研究摘要表达明显刚目,其表达鼠通过研究坏氧合酶一匆骞押塑账岫怨卑〩赴囊种谱用,从和蛋白表达及细胞周期的再分布矫娑云湟种圃理进行分析,柬探讨反义寡核苷酸对宫颈癌的治疗意义。方法:细胞用嘌逋馀嘌⒂孟晕⒕刀云渖ぷ刺泄鄄臁设计并合成特异性的反义寡核苷酸。将细胞分为椋烦6照组:不行干预措施:篎义寡核苷酸—预组:转染正义核苷酸:罩侍甯稍ぷ椋河弥侍宕怼匆骞押塑账—干预组鹤H綜一匆骞押塑账嶂僚ǘ;反义寡核苷酸下预组鹤H綜..至浓度痩;反义寡核苷酸干预组转染—至浓度/对镠赴砗笈嘌鴏小时,分别在转染后、、用法检测不同组细胞的增殖情况;谧H竞检测的表达水平:用産检测各组蛋白的表达;采用流式细胞仪测定蛋白的表达量;转染后昧魇较赴遣舛ㄏ赴芷诘谋浠结果:甇H镜南赴龀せ郝罅肯赴槠攵哉兆日比,活细胞数显著减少。—抑制效果与作用时问有关,转染后—小时抑制效果最强,如果不行—补充,∈币种菩Ч鞠А峁允続狾镃一与—作用的浓度有关系,时抑制效果明显强丁¨及/,与其他组比较,—。目的:温川医学院坝学位论史
一匆骞押塑账岫韵赴芷诘挠跋欤细胞转染后小时,检测各组细胞的细胞周期/、疢期细胞的;反义组为:脂质体组为.±,、繭.。与对照组、『遄榧爸侍组比较,处理的细胞,/。结论:.匆骞押塑账岫訦赴脑鲋秤幸种谱饔茫甇訡一鞍妆泶镉幸种谱饔茫黄浔泶镆种频幕砜赡苡胍制翻译为蛋白引起其表达量的下降有关:甇山档虷赴芷谥蠸期、增加一谙赴谋壤M测细胞增殖抑制可能与细胞周期中/柚陀泄亍关键词:环氧合酶一环匆搴塑账幔汗卑百分率,对照组:.±.±.;『遄槲#.、.±.±±.±±温仆裱г喊觢。学位论奠
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宫颈癌是女性生殖器第二大恶性肿瘤,是生殖年龄妇女恶性肿瘤死亡的首要病因,在全世界范围内,每年约有蛐路⑾值墓卑┎±虼耍卑┑闹疗方法问题倍受关注。目前的治疗方法以手术治疗为主,辅助以化疗、放疗,癌自口期病变和早期宫颈癌手术治疗疗效较好,但进展期宫颈癌术后尽管辅以化疗、放疗,其五年生存率仍很低,且化疗对机体的副作用较大,抑制免疫系统也不利于疾病恢复,放疗对有些类型的寓颈癌疗效不理想,尚有放射线致癌的可能,所以,探索宫颈癌更有效的治疗方法成为国内外学者共同关注的问题。┗颍弑泶镉诙嘀肿;赴投裥组织中,目前正常宫颈组织中的表达情况尚未得到一致性的结沦,有报道表达可见于所有宫颈期癌组织,尤其在侵润性位点,且在侵涧性位点可明显见到凋亡抑制⋯,高表达与化疗抵抗有关【,宫颈癌中高表达者多有预后不良且容易复发、【。因此通过抑制表达来达到宫颈癌治疗目的成为众多学者研究的热点。通过反义核亡核嵋种铺匾斓陌┗虮泶锸锏街琢鲋瘟频哪康模墙昀此着分子生物学发展,根据基因表达规律而探索的治疗恶性肿瘤的新思路,其原理是合成目的癌基因表达的特异的中的一段互补序列,通过转染使其进入目的细胞内与特异的结合,来促进该降解或阻断其翻译为蛋白以达到抑制癌基因表达的目的。对于反义核苷酸互补序列的结合位点尚无一致的结论,目旱难芯慷嘌≡裨贏区或潜嗦肭本课题以宫颈癌细胞为研究对象,用反义寡核苷酸转染细胞后,培养~∈保鄄炱涠訦赴鲋车囊种谱饔茫涸偻ü,进一步为反义寡核苷酸用于富颈癌的治疗提供实验依据。日Ⅱ舌温卅窖г旱宦垡
环氧合酶一匆骞押塑账岫怨卑〩赴囊种谱饔第一部分摘要目的研究反义寡核苷酸甇剥‘宫颈癌细胞的抑制作用。方法细胞生长观察实验按照条件培养基制备的不同,可分为以下椋篈组:细胞对照组,仅用常规培养液培养甅/:椋赫遄椋加入萨义核苷酸至终浓度痩甇狹;睿褐体狹。每孔设龈纯祝篋组:反义寡核苷酸转染组:设置个浓度亚组,分别转