文档介绍：重庆医科大学
硕士学位论文
Survivin反义寡核苷酸对K562细胞耐药性的研究
姓名:杨山
申请学位级别:硕士
专业:儿科学
指导教师:徐酉华
20080501
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碘化丙锭蛋白激酶磷脂酰丝氨酸核糖核酸酶吼链亲和霉素一生物素一过氧化物酶复合物法拓扑异构酶堑鞍足叶乙甙柔红霉素。—重庆医科大学硕士研究生学位论文‘。·’。
反义寡核苷酸对细胞耐药性的研究摘要⑾赴鸵┬缘募觳狻匆骞押塑账岱直鹆:匣埔┪无义组及脂质体组两两比较,型臣蒲б庖濉细胞的实验中,虯对细胞的分别目的:探讨反义寡核苷酸对白血病细胞耐药性的影响。为临床肿瘤治疗提供实验依据。方法:⒆H緎匆骞押塑账岫訩赴鹲泶锏挠跋臁实验分四组:反义组、无义组、脂质体组、空白组。反义及无义寡核苷酸两端均有黾罨虼奘危衾胱又侍褰榈嫉姆绞浇凶染。转染小时后用的方法检测表达。阿霉素、柔红霉素共同作用于细胞。实验分四组:单用组、单用椤组、椤Sτ肕法,。匆骞押塑账崃:习⒚顾刈H綤赴鄄煜赴药物浓度的变化。实验分三组:空白组、单药组、联合组。反义寡核苷酸分别与阿霉素,柔红霉素作用,ú庀赴谝┪镉ü强度的改变。结果:,而无义组及脂质体组无明显变化。反义组与⒃诨埔┪镅芯苛:嫌τ胹匆骞押塑账峁餐饔肒重庆医科大学硕士研究生学位论文
为年/,。柔红霉素齐岷烀顾囟訩赴分别为还/,⒂肕法测定虯时细胞内荧光强度分别为矛时细胞内荧光强度风别为.、.。两组比较结论:;反义寡核苷酸与阿霉素和柔红霉素联合作用可提高细胞内药物浓度,降低细胞生存率,部分逆转耐药,为临床探索低耐药的肿瘤治疗提供实验依据。关键词:寡核苷酸,反义,细胞,耐药性,肿瘤重庆医科大学硕士研究生学位论文
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反义寡核苷酸对细胞耐药性的研究刖白血病是造血系统的恶性肿瘤,在儿童一直高居肿瘤发病率的首位,严重危害儿童的生命,其年发病率为颉K孀呕啤⒎帕啤⒏上赴浦驳茸酆现疗措施应用,白血病的治疗及预后有了极大的改观。但必须看到,仍有一部分病人治疗效果不佳,甚至不能缓解,如何提高这部分患者的治愈率成为临床和科研细胞耐药是影响白血病的治疗及预后的重要因素,如何逆转耐药就成为我们本次实验的目的。是新迸发现的凋亡抑制基因,研究表明其与细胞耐药密切相关,因此结合基因研究其对细胞耐药性的影响就成为我们研究的课大量研究发现:基因在肿瘤细胞中的高表达,抑制细胞凋亡作用以及‘卜参与对细胞分裂的调控作用咖与细胞耐药密切相关。由于基因在肿瘤细胞中的特异性表达,因而针对基因的靶向性治疗可能是一种理想的肿瘤治疗措施【,而对正常组织产生较小的损伤。研究表明将基因反义核苷酸转染肿瘤细胞后,可促进肿瘤细胞的分化与凋亡。取】报道,在人卵巢癌细胞中稳定转染,可导致卵巢癌细胞对紫杉醇的抗药性增加倍,同时因紫杉醇引起的细胞凋亡降低,证明基因在降低卵巢癌化疗耐药中具有重要地位等【糠⑾衷谀捅戆⒚,基因及基因均高表达,┬允币卜⑾郑谀鸵┫,在耐药细胞中,与的表达具有明显正相关性⋯】。研究证明在阻断基因表达后,同时可以降低基因的表达而增加赴远辔髯仙即嫉拿舾行裕阿霉素与柔红霉素是白血病的常用化疗药物之一,,阻止断裂吹脑倭樱斐蒁双链断裂,从而杀灭细胞。因此我们可以选择适当浓度的阿霉素与柔红霉素与反义寡核苷酸联合作用于细胞,通过检测细胞的生存率,研究能否使传统的化疗与现代的基因治疗方法相结吾的一项重要任务。题。重庆医科大学硕士研究生学位论文珻:
牧嚣纛细胞人白血病细胞株由外科研究室传代保存合,使它们产生互补作用,获得治疗白血病的新方法。我们课题组在前面的研究中已经证实,基因反义寡核苷酸能够使白血病细胞株向红系及粒系分化、基因反义寡核苷酸能够使白血病细胞株凋亡增加。本实验延续课题组以前的研究,将基因反义寡核苷酸以阳离子脂质体介导的方法【】转染入白血病细胞株,联合化疗药物,检测细胞的耐药性的改变,变化。通过多种方法检测联合应用后细胞