文档介绍：第六章微生物的生长及其控制
第一节测定生长繁殖的方法
第二节微生物的生长规律
第三节影响微生物生长的主要因素
第四节微生物的纯培养
第五节有害微生物的控制
第七章微生物的生长及其控制
生长(growth):微生物在适宜的条件下,不断从周围环境中吸收营养物质转化为构成细胞物质的组分和结构,使个体细胞质量增加和体积增加,称为生长。
繁殖(reproduction):细胞个体数目的增加称为繁殖。
个体和群体的关系:
个体生长→→个体繁殖→→群体生长
群体生长=个体生长+个体繁殖
第一节测定生长繁殖的方法
目前测定微生物群体生长的方法大致不外乎二大类:一类是测定细胞物质量的增加;一类是测定细胞数目的增加。
1、侧生长量(细胞量的测定)
(1)干重法:该方法是将单位体积培养液中的菌体,用清水洗净,然后放入干燥器内加热或减压干燥,最后再用精密仪器测定其干重。一般来说,干重约为湿重的10~20%,即1mg干菌=5~10mg湿菌=4~5×109个菌体。
(2)间接法
①比浊法:其原理是根据在一定的浓度范围内,菌悬液的微生物细胞浓度与液体的光密度成正比,与透光度成反比。菌数越多,透光量越低。因此,可使用光电比色计测定,通过测定菌悬液的光密度或透光率反映细胞的浓度。
②生理指标法——测含氮量法:微生物细胞的含氮量一般比较稳定,所以常作为生长量的指标。如细菌含氮量约为菌体干重的14%。。
③其他法:另外还有测定耗氧量或其它代谢产物作为细胞量的指标。
2、测繁殖数(细胞数的测定)
适用范围:单细胞状态(细菌、放线菌),以计算个体数目为计算原则。
常用的方法有:
(1)显微直接计数法
即在显微镜下直接进行计数,常利用细菌计数板和血球计数板进行计数。
总菌数(活菌、死菌)
(2)平板菌落计数法:这是实践中最常用的一种方法。常用来测定牛奶、食品、水及其它材料中的含菌数。有些细菌如无法在固体培养基中生长或其他原因,可用液体稀释法,借助统计学来判断其活菌数。通过查MPN(Most Probable Number)来测知样品中活菌的可能数目。
(3)薄膜过滤计数法:将定量的样品(空气或水)通过薄膜后,菌体被阻留在滤膜上,取下薄膜进行培养,计算上面的菌数而求出样品中所含菌数。这种方法适用于测定量大但含菌数少的样品。
第二节微生物的生长规律
一、细菌的个体生长和同步生长
1、研究微生物生长变化规律的方法
(1)用电子显微镜观察细菌细胞的超薄切片;
(2)采用同步培养技术,观察群体生长变化来研究个体的生长变化。
2、同步培养
同步培养:设法使群体中的所有细胞尽可能都处于同样细胞生长和分裂周期,这种培养方法称为同步培养。
同步生长:利用同步培养技术而使细胞群体处于分裂步调一致的状态(在培养物中的所有细菌,都处于同样细胞生长和分裂周期中生理状态),称为同步生长。
3、获得同步生长的方法:诱导法和筛选法
(1)诱导法:通过环境条件
化学诱导法:利用停止或限制供给微生物细胞分裂所必需的某种养料,使所有的细胞都处于临分裂状态(但不分裂),然后在某一时刻供给细胞分裂所必需的养分,就能诱导出同步细胞群体。
物理诱导法:是利用某些物理因子,使处于即将分裂的细胞的代谢活动受到抑制,从而使细胞在分裂阶段前停止,以求得以后分裂的同步。