文档介绍：中南大学
硕士学位论文
儿童结核性脑膜炎脑脊液蛋白质组学的初步研究
姓名:张红媛
申请学位级别:硕士
专业:儿科学
指导教师:尹飞
20070501
摘要珻鞍字仕蚰旱缬就计祝秆/特异吸附电离飞行时间质谱猘目的结核性脑膜炎,逼谝恢严重的中枢神经系统感染性疾病。其病死率为%~%,幸存者中有%~%留有永久性神经系统后遗症。发病机制尚不完全清楚,诊断困难,预后较差。蛋白质组学技术是近年来出现的一种研究特定细胞、组织或完整生物体所表达的全部蛋白质及其活动规律的新兴学科。本实验通过该技术建立正常中国儿童及患儿脑脊液性蛋白,为的早期诊断提供线索,同时也为其发病机制的深入了解提供新思路。方法收集急性期、治疗鲈潞蠹罢6哉兆槎疌各,三氯乙酸。沉淀法获取艿鞍质,,考马斯亮蓝染色,扫描仪以及扫描软件对凝胶进行扫描获取图像。利用图像分析软件以正常儿童何2慰冀海玊毙云贑的凝胶与之进行比较分析,寻找两组鞍字势椎囊斐1浠叩恪T僖急性期何2慰冀海玊瘟个月后河胫比较分析,观察差异蛋白质斑点的变化情况。筛选出分辨清楚、仅在急性期斜泶锏牡鞍字拾叩悖腥『蠼谢矢ㄖす饨—狹分析,获得肽质量指纹狿/,中南大学硕士学位论文
结果正常儿童掷牖竦玫鞍字拾叩个,急性期与相关的蛋白质差异位点。经质谱分析及生物信息学技术初步鉴图谱擞蒙镄畔⒀Ъ际趸袢〉白的基本信息,确定差异蛋白质。掷牖竦玫鞍字拾叩个,其中有个蛋白质点仅在正常表达,个蛋白质点仅在急性期斜泶铮赥毙云诟丰度表达的蛋白质点,在治疗鲈潞驝中表达量均下调。与正常鞍字实惚泶锪勘冉希琓毙云谟龅鞍字实惚泶量有兑陨系纳系鳎个蛋白质点表达量有兑陨系南碌鳌9选出个差异蛋白质点进行猅—分析,获得了张=胧菘饨兴阉骱笃ヅ涞降鞍字实牡阌觯⑾衷刂蛋白、免疫球蛋白础⑷硕嗫寺∶庖咔虻鞍譓冷凝集素片段、免疫球蛋白九轻链鞍住⒚庖咔虻白跃轻链可变区、抗肿瘤坏死因子位抗体、免疫球蛋白碏片段、免疫球蛋白、甀嗫乖璂、鞍住蛋白在急性期刑匾煨员泶铩结论本实验首次成功建立了正常儿童隩级鵆的双向凝胶电泳图谱。通过凝胶图像分析和计算机信息处理,发现了一些定了部分差异蛋白质,发现载脂蛋白⒖怪琢龌邓酪蜃觓抗体、类抗原—蛋白可能与的发生发展密切相关,这些蛋白能否成为诊断的标记物,值得进一步的研究。关键词结核性脑膜炎,蛋白质组学,儿童,脑脊液中南』渡涎宦哿Ⅱ
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英文缩略语简表杌羟基肉桂酸凝胶电泳过硫酸胺脑脊液乙腈二硫苏糖醇髓系相关蛋白肽质量指纹图谱氟化苯甲磺酰十二烷基磺酸钠缩略语英文全称血琋,甆中文全称双向聚丙烯酰胺载脂蛋白甀0繁甲基铵一卜丙烷磺酸疾病特异性蛋白乙二胺四乙酸人类白细胞抗原固相梯度基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术分子量美国国家生物技术中心光密度等电点三氯乙酸四甲基乙二胺甲苯磺酰苯丙氨酰氯甲酮猅—暨/
结核性脑膜炎肿瘤坏死因子三氟乙酸中南大学硕宦畚英文缩略语简表
作者签名:幺垒遂日期:二生贶言隆K埽原创性声明关于学位论文使用授权说明本人声明,所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知,除了论文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得中南大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均己在在论文中作了明确的说本人了解中南大学有关保留、使用学位论文的规定,即:学校有权保留学位论文,允许学位论文被查阅和借阅;学校可以公布学位论文的全部或部分内容,可以采用复印、缩印或其它手段保存学位论文;学校可根据国家或湖南省有关部门规定送交学位论文。明。
第一章前言可逆的脑损害可能己经出珊”,因此脑脊液培养结核杆菌不能作为早期诊断的方来,一直是严重威胁人类健康的重症结核病之一,发病机制尚不清楚,易误诊,致残致死率高。据全国结核病流行病学调查表明,我国结核病的发病率为虺埃个未经治疗的原发性结核感染中,就有龅贾陆岷诵阅阅来,由于抗生素特别是抗结核药的应用,不典型结脑有增加趋势,临床表现复杂,常引起误诊,误诊率约为..ィ骄%。但结核性脑膜炎是可以核杆菌培养的难度。而脑脊液培养发现结核杆菌是诊断结脑的金指标【,但其阳验室诊断方法,聚合酶链反应刺逋饣蚶┰觯羌韧芯拷隙嗲胰衔阴性和假阳性的报道也比较4送猓琍阴性亦不能完全排除结脑,而且该断的金指标。因此寻找一种新的有效的、快速的诊断结核性脑膜炎的方法是目前临床上亟待解决的问题。即功能基因组时代,从基因组整体水平上对基因